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本试验以苹果砧木M26为材料,在前期磷酸化蛋白组学测序的基础上,筛选出TFIIE(General transcription factor IIE subunit 1-like)、ACBP4(Acyl-CoA-binding domain-containing protein 4)和MAP70-1(Microtubule-associated protein 70-1-like)差异蛋白,再通过RT-PCR法克隆TFIIE、ACBP4和MAP70-1基因,同时构建植物双元表达载体,利用农杆菌介导法将上述三个基因成功导入WS Columbia拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株中,并应用PEG胁迫对TFIIE、ACBP4和MAP70-1基因进行功能鉴定。主要研究结果如下:1.克隆得到TFIIE、ACBP4和MAP70-1基因,基因登录号分别为MG878870、MG878871、MG878872。TFIIE和ACBP4基因,片段大小分别为1413 bp、2016 bp,均与白梨氨基酸序列同源性最高,分别为97.87%、94.82%;MAP70-1基因片段大小为1860bp,与草莓MAP70-1氨基酸序列同源性高达91.20%。2.荧光定量PCR显示,M26苹果盆栽苗在持续控水20 d、40 d和60 d时,TFIIE的表达水平均上调;ACBP4的表达水平下调;MAP70-1的表达相对稳定。3.构建组成型启动子35S驱动的植物双元表达载体,并成功转化农杆菌EHA105,命名为pBI121/TFIIE/EHA105、pBI121/ACBP4/EHA105、pBI121/MAP70-1/EHA105。4.分别转化获得3个基因的转基因T2代拟南芥植株。经15%PEG胁迫处理,转基因拟南芥中TFIIE基因上调2.35倍,ACBP4基因下调1/3,MAP70-1基因与对照无显著性差异。这3个基因的T2代转基因种子在PEG胁迫下的萌发率分别为90.3%、76.23%和88.66%,成活率分别为79.68%、28.30%和54.35%。