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小麦黄花叶病是我国长江、黄河中下游小麦产区的重要病毒病害,每年发生200万hm2,造成减产1.5×109kg,对我国粮食安全生产造成了重大的威胁。引起我国小麦黄花叶病的主要病原是小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus, WYMV)。WYMV属于马铃薯Y病毒科(Potyviridae),大麦黄花叶病毒属(Bymovirus),其基因组为两条正单链RNA,分别包装在不同的粒子内。该病毒通过土壤中的禾谷多黏菌(Polymyxa graminis L.)进行传播。本论文测定了山东泰安、临沂两个WYMV分离物的全基因组序列,分析了WYMV的遗传进化特点,绘制了其蛋白的互作图谱,明确了P1蛋白的互作结构域,确定WYMV蛋白在本氏烟表皮细胞的定位。本文的主要研究结果如下:1、除ploy(A)外,WYMV泰安、临沂两个分离物的RNA1全长均为7635nt, RNA2为3651nt。依据RNA1和RNA2的ORF序列构建的系统进化树中,WYMV均分为2个组(Ⅰ和Ⅱ),其中Ⅰ组均可以再分为2个亚组(Ia和Ib)。泰安的RNA1ORF均被聚类到Ⅱ组,RNA2ORF聚类到Ib亚组,临沂分离物的RNA1ORF和RNA2ORF均聚类到Ⅱ组。2.通过酵母双杂交发现P3NPIPO、7K、CI、VPg、NIa-Pro、CP、P1能够发生自身互作;P3能够和CP、Nib互作,P3NPIPO除自身互作外,能够和14K、NIb、CP互作;7K除自身互作外,还能够和P1、P2、CI、14K、NIb、CP互作;CI除自身互作外,能与7K、NIa-Pro. CP互作;14K能与P3NPIPO、7K、VPg、NIa-Pro、P2.NIb互作;VPg除自身互作外,还可以和14K、NIb、CP、P1互作。NIa-Pro能与自身互作,还与CI、14K、CP互作。NIb能与除CI、NIa-Pro、NIb和P1外的蛋白互作,CP除能够自身互作外,还能够和除14K以外的其他蛋白进行互作;P1除自身互作外,还与7K、CP、VPg、P2互作;P2与7K、14K、NIb、CP、P1均能够互作,且部分蛋白之间在酵母中的互作具有方向性。通过酵母双杂交和BiFC实验,进一步明确了P1自身互作的结构域在P1的N-端(1-86aa),而且是N-端与N-端的互作。3.将WYMV各蛋白与GFP融合表达,在植物烟草表皮细胞观察绿色荧光的分布,发现NIb定位于细胞核中,P2散布于细胞质中,且定位于细胞之中网状结构上;P1,CP在细胞质形成小囊泡;P3、CI分布于细胞质中以及质膜上;NIa-Pro.7K散布于细胞质中。14K、P3N-PIPO定位于细胞膜;VPg定位于细胞核中,且位于细胞核核仁中。