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目的：
对河南女性阴道炎的流行情况进行调查,了解河南女性滴虫病的患病率；收集虫株进行甲硝唑及替硝唑最小致死剂量的测量,并对甲硝唑抗性与人型支原体共生之间的关系进行研究。
方法：
流行病学调查在郑州市妇幼保健院和内黄县中医院的妇科门诊进行,对960例健康体检者及门诊患者通过问卷调查就诊者的年龄、职业、婚姻状况、卫生状况及生活流动性,对就诊者的阴道分泌物进行常规涂片检查。
研究所用阴道毛滴虫虫株标本由郑州市妇幼保健院检验科提供,标本来自女性患者。研究共收集了45例标本,用肝浸汤培养基在37℃温箱中培养,有2例培养失败,2例污染,余41例虫株进行培养,培养3代后至无菌培养期,进行甲硝唑及替硝唑最小致死剂量(MLC)测量。41例虫株提取基因组DNA,用PCR方法检测41例阴道毛滴虫与人型支原体的共生情况。利用MGE-PCR技术,分析部分敏感虫株与耐药虫株Tvmarl基因的位置多态性,利用临位相接法(Neighbour-joining,NJ),并借助MEGA3.1分析软件,以Tvmarl基因的位置变化为基础构建聚类树状图。
结果：
1.河南省女性滴虫病的患病率为5.10％,且与年龄、职业、婚姻状况及卫生状况具有相关性,年龄、职业分布经统计学处理(P<0.05)具有意义。
2.在41例虫株中有4例甲硝唑抗性株(9.75％)和13例敏感性降低的虫株,在4例抗性虫株中,有2例虫株对替硝唑的敏感性降低,41例虫株其甲硝唑抗性平均值为12.61μg/ml,而替硝唑抗性平均值为1.71μg/ml,甲硝唑抗性平均值是替硝唑抗性平均值的7.37倍。
3.41例阴道毛滴虫虫株中,31例虫株被证明有人型支原体的共生,感染率为75.61％。在31例人型支原体感染阳性的阴道毛滴虫虫株中,包括了4例抗性株和13例甲硝唑敏感性降低的虫株。另外,人型支原体感染阳性的虫株,其甲硝唑抗性的平均值15.72μg/ml是人型支原体感染阴性的虫株甲硝唑抗性平均值4.16μg/ml的3.78倍。
4.本次试验利用Tvmarl的位置多态性分析10例虫株(敏感虫株与耐药虫株)之间的进化关系。从进化图中可以看出3例抗性株(TV23、Tv25、Tv30)分布在同一分支上,显示较为密切的遗传关系。而Tv29与这3例虫株的遗传关系较远,与Tv9则有较近的遗传关系。Tv7与Tv19、Tv24显示更为密切的关系,但4例抗性株仍显示了密切的遗传关系,平均相似系数为83.5％。
结论：
1.滴虫病目前仍是威胁河南女性生殖健康的重要因素,且河南地区阴道毛滴虫有部分虫株对甲硝唑出现耐药现象,耐药率为9.75％。
2.在中国(郑州)流行的阴道毛滴虫内共生的人型支原体可能与甲硝哗抗性之间存在一定相关性,且耐药虫株之间显示了密切的遗传关系。