葛根等中草药化学成分提取与分离研究

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中医药是我中华文明非常重要的一部分,它是我华夏民族历经几千年与疾病斗争,并将实践与理论经验相结合,不断积累并不断发展和壮大的医学宝藏。近些年来,随着国家的高速发展,人们的生活水平得以极大程度地提高,与此同时人们的注意力已经开始向健康养生的转变,中医药再一次走进人们的视野,并受到了整个社会的高度重视。将中医药与现代科技相结合,更能使得中医药独特魅力与价值被挖掘出来。本文使用大孔吸附树脂与制备型高效液相(PHPLC)相结合的方法,对葛根、槐角和母丁香中部分有效成分进行提取工艺和分离纯化的优化选择,并结合高效液相(HPLC),液质连用(HPLC-MS),紫外光谱(UV)分析和结构鉴定。本文可以对葛根等中药下一步进行规模化纯品分离和药理研究提供帮助。1.大孔吸附树脂结合制备型高效液相对葛根成分分离创建葛根中成分的最优提取工艺:15倍量的60%的甲醇超声提取,每次1.5 h,提取2次。通过吸附和解析实验,对6种大孔吸附树脂的理化性能进行比较,选择合适的树脂再进行葛根中成分除杂和目标成分的初步分离。然后以制备型高效液相对经过树脂处理过的提取物进行分离纯化,选出较适合葛根黄酮的PHPLC分离条件是上样量:1.0 mL(20 mg),检测波长:250 nm,流动相:乙腈-水(20:80,V/V),流速:30 mL/min等度洗脱,得到3’-羟基葛根素等五种黄酮的纯品,纯度依次为91.38%、90.65%、93.77%、93.56%、91.71%,同时经过紫外光谱,液质与核磁共振波谱对此五种物质进行了确定。2.大孔吸附树脂结合制备型高效液相对槐角成分分离创建槐角中成分的最优提取工艺:90%乙醇回流提取,料液比1:10,每次提取时间为1 h,提取3次。通过吸附和解析实验,对7种大孔吸附树脂的理化性能进行比较,初步摸索树脂吸附量,选择合适的树脂对槐角中目标成分的初步分离。再结合制备型高效液相对树脂分离物分两次进行分离,得到山奈酚-3-O-β-L-鼠李糖基-(1-6)-β-D-葡萄糖苷、染料木素-7,4’-di-O-β-D-葡萄糖苷、染料木素-7-O-β-D-葡萄糖苷-4’-O-α-L-鼠李糖基-(1-2)-β-D-葡萄糖苷、染料木素-4’-β-L-鼠李糖基-(1-2)–α-D-葡萄糖苷,同时由高效液相测得纯度依次为96.7%、97.2%、97.8%、94.9%,结合液质、紫外和核磁共振波谱对这四种物质的成分进行了确定。3.母丁香中苯酚类衍生物的提取工艺与分析研究创建母丁香中苯酚类衍生物的最优提取工艺:70%乙醇回流,料液比为1:10,每次提取时间为1 h,提取3次,乙酸乙酯萃取二次,得到母丁香酚和丁香酚的粗提物。通过分析型型高效液相条件初步摸索,制备型高效液相对母丁香提取物进行分离,得到丁香酚和母丁香酚,注入高效液相测得纯度为96.3%和98.5%,通过紫外和液质进行成分确定。
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