布鲁氏菌纳米抗原颗粒的构建

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布鲁氏菌病(简称布病)是布鲁氏菌引起的人畜共患传染病,在世界各地广泛的流行和传播。该病不但严重影响畜牧业的发展,对人类的健康也构成相当大的威胁。特别是发展中国家,难以对其进行彻底清除。疫苗免疫一直是控制布鲁氏菌病的主要手段,目前兽用疫苗多为减毒活疫苗,如S19、Rev.1、M5、S2等,但它们在有效性和安全性方面存在诸多问题,如易感染人、干扰血清学诊断、母畜易流产、以及毒力增强等缺陷,而且至今尚无有效的安全的人用布病疫苗。因此,开发安全有效的新型疫苗是防控布鲁氏菌病的主要研究内容。P39和Rsα是羊布鲁氏菌的两种保护性抗原蛋白,可以将其用做布鲁氏菌病的候选疫苗。近年来有大量研究表明纳米尺寸的抗原会增强抗原免疫原性,此外纳米疫苗可承载多种抗原,提供抗原稳定性和靶向性。本研究纯化P39和Rsα两种蛋白,采用水热法制备了酚醛树脂磁性复合微球Fe3O4@CFR纳米粒子,将纯化后的P39和Rsα蛋白与被酚醛树脂修饰后的Fe3O4磁性材料纳米粒子吸附,用于免疫实验小鼠,比较评价纳米材料对两种蛋白产生抗体的影响。实验结果表明,P39蛋白在免疫过程当中,弗式佐剂和纳米粒子均能使P39抗体水平,随着时间增加而提高,但添加弗式佐剂比纳米粒子承载抗原产生的抗体水平高。Rsα蛋白纳米粒子相对于弗式佐剂Ig G、Ig G1和Ig G2a水平都有升高,其中Ig G和Ig G1显著升高,但Ig G2b和Ig M水平,未有明显变化。由此可见,纳米粒子对不同抗原产生抗体的影响有差异,对P39蛋白抗体水平影响不大,而可以提高Rsα蛋白抗体产生。本研究表明纳米粒子可以提高抗原诱导产生抗体产生,但是不同抗原可能存在差异,可以在一定程度上促进Ig G2a的诱导水平,可能对Th1型免疫有影响,可为将来布鲁氏菌病新型疫苗的研制提供实验依据。
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