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研究背景胆囊结石目前已成为影响人类健康的多发病,其中约85%为胆固醇结石,但其形成机制目前仍不清楚。近年来研究发现,胆囊结石胆汁成份的改变可能是影响胆囊收缩功能的直接因素,进而促进胆囊结石的形成。Ⅰ型胆囊收缩素受体(cholecystokinin-1receptor, CCK-1R)广泛分布于胆囊平滑肌和黏膜细胞,通过与其配体胆囊收缩素(cholecystokinin, CCK)结合,引起胆囊收缩。小窝蛋白-3(caveolin-3, Cav-3)是小窝内的重要骨架蛋白,在G蛋白信号传导中发挥着重要的作用。体外实验发现胆囊结石患者胆囊平滑肌细胞细胞膜上胆固醇含量升高,Cav-3蛋白表达升高,与CCK-1R结石增加,使CCK与CCK-1R的亲和力下降,导致平滑肌收缩功能减弱。将胆汁总胆固醇(total cholesterol, TC)测定与胆囊收缩功能结合进行分析,同时在组织细胞水平观察其对CCK-1R与Cav-3表达影响,目前尚无报道。目的(1)研究胆囊结石患者和非胆囊结石患者血清中成分的差异；(2)研究胆汁中TC含量和胆囊收缩功能的关系；(3)研究胆汁中TC含量升高对CCK-1R和Cav-3表达的影响,探讨其抑制胆囊收缩功能的机制。方法(1)收集胆囊结石患者和非胆囊结石患者静脉血,分析比较血清成分的差异；(2)收集胆囊结石患者和非胆囊结石患者胆汁,并测定胆汁中TC和TBA含量；(3)行胆囊手术之前测定胆囊结石患者的胆囊收缩功能；(4)采用免疫组化方法观察结石组和非结石组胆囊黏膜和肌层中CCK-1R和Cav-3的表达。(5)采用免疫荧光方法定位观察CCK-1R和Cav-3的表达,并比较二者的共表达情况。结果(1)两组患者血清中成分并无明显差异。(2)胆囊结石患者胆汁中TC及TBA含量显著高于非胆囊结石患者胆汁中TC及TBA含量。(3)胆囊收缩功能较差的患者胆汁中TC含量明显高于收缩功能较好的患者胆汁中TC含量。(4)结石组患者的EF值与其胆汁中TC的含量之间存在显著负相关关系。(5)免疫组化结果显示结石组胆囊黏膜中Cav-3的表达量明显高于非结石组,肌层中Cav-3的表达量在两组中无明显差异。CCK-1R的表达量在两组胆囊黏膜及肌层中无明显差异。(6)免疫荧光结果显示在结石组中CCK-1R和Cav-3在胆囊黏膜和肌层中均有明显共表达,而在非结石组则无明显的共表达现象。结论胆汁中TC含量升高可抑制胆囊收缩功能,其机制与胆囊黏膜和肌层中过多的Cav-3和CCK-1R结合进而影响CCK功能有关。