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目的:观察左归补髓生血颗粒干预AA大鼠脾脏中转录因子T-bet、GATA-3蛋白和造血负调控因子IFN-γ蛋白表达水平的变化及三者之间的联系,探讨左归补髓生血颗粒对于AA模型大鼠免疫系统的影响,为AA临床治疗的理论研究提供实验依据,为AA的治疗提供新的研究思路及方法。 方法:采用苯与环磷酰胺联合诱导建立AA大鼠模型。72只成年健康雄性SD大鼠,适应性喂养1周后,随机分组为:空白组12只,造模组60只。造模组按照1.5mL/kg体重皮下注射苯,隔日一次,共注射7周;在第36、37、38、39、40天按照25mg/kg体重腹腔注射环磷酰胺,每日一次。造模完成2周后,将造模组的大鼠随机分为5组,分别为模型组、司坦唑醇组、左归补髓生血颗粒小、中、大剂量组,每组各12只。按司坦唑醇组2.8mg/kg、左归补髓生血颗粒小剂量组0.35g/kg、中剂量组0.7g/kg和大剂量组1.4g/kg灌胃给药,灌胃体积为1ml/l00g体重,每日一次;模型组和空白组的大鼠均给予等量的去离子水灌胃,用药4周。在无菌条件下,摘取大鼠的脾脏,Western-blot检测各组大鼠脾脏中IFN-γ、T-bet、GATA-3蛋白的表达水平。 结果: 1.左归补髓生血颗粒对AA大鼠脾脏中转录因子T-bet蛋白表达水平的影响: 空白组与模型组的大鼠脾脏中均存在T-bet蛋白的表达,与空白组相比,模型组T-bet蛋白表达水平增高,有统计学差异(p<0.01);与模型组相比,司坦唑醇组及左归补髓生血颗粒大、中、小剂量组T-bet蛋白的表达水平均降低,有统计学差异(p<0.01);与司坦唑醇组相比,左归补髓生血颗粒大剂量组的T-bet蛋白表达水平有升高趋势,但不存在统计学差异(p>0.01),左归补髓生血颗粒中、小剂量组的T-bet蛋白表达水平增加,有统计学差异(p<0.01);与左归补髓生血颗粒大剂量组相比,左归补髓生血颗粒中、小剂量组的T-bet蛋白表达水平增加,有统计学差异(p<0.01);与左归补髓生血颗粒中剂量组相比,左归补髓生血颗粒小剂量组的T-bet蛋白表达呈升高趋势,但是无统计学差异(p>0.01)。 2.左归补髓生血颗粒对AA大鼠脾脏中转录因子GATA-3蛋白表达水平的影响: 空白组与模型组的大鼠脾脏中均存在GATA-3蛋白的表达,与空白组相比,模型组的大鼠脾脏中GATA-3蛋白的表达水平降低,有统计学差异(p<0.01);与模型组相比较,司坦唑醇组及左归补髓生血颗粒大、中、小剂量组GATA-3蛋白表达均增高,有统计学差异(p<0.01);与司坦唑醇组比较,左归补髓生血颗粒大、中、小剂量组的GATA-3蛋白有降低趋势,但是无统计学差异(p>0.01);与左归补髓生血颗粒大剂量组相比,左归补髓生血颗粒中、小剂量组的GATA-3蛋白表达降低,有统计学差异(p<0.01);与左归补髓生血颗粒中剂量组相比,左归补 髓生血颗粒小剂量组的GATA-3蛋白表达有下降趋势,但是无统计学差异(p>0.01)。 3.左归补髓生血颗粒对AA大鼠脾脏中细胞因子IFN-γ表达的影响: 空白组与模型组的大鼠脾脏中均存在IFN-γ的表达,相比于空白组,模型组IFN-γ表达水平增高,有统计学差异(p<0.01);相比于模型组,司坦唑醇组及左归补髓生血颗粒大、中、小剂量组IFN-γ表达均降低,有统计学差异(p<0.01);与司坦唑醇组比,左归补髓生血颗粒大剂量组的IFN-γ蛋白表达呈增高趋势,但是无统计学差异(p>0.01),左归补髓生血颗粒中、小剂量组的IFN-γ蛋白表达增加,有统计学差异(p<0.01);与左归补髓生血颗粒大剂量组相比,左归补髓生血颗粒中、小剂量组的IFN-γ表达增加,有统计学差异(p<0.01)。与左归补髓生血颗粒中剂量组相比,左归补髓生血颗粒小剂量组的IFN-γ表达有增高趋势,但是无统计学差异(p>0.01)。 结论:左归补髓生血颗粒可以改善AA大鼠的造血功能,调节AA大鼠的免疫紊乱,延缓大鼠AA病情的进展,可能是通过调控IFN-γ、T-bet、GATA-3的表达水平来实现的。