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第一部分：TNAP在心脏、肾脏纤维化中表达上调 目的：探讨TNAP在心脏及肾脏纤维化中的表型变化。 方法：采用结扎冠状动脉前降支的方法构建大鼠心肌梗死(Myocardial infarction, M I)诱导的心脏纤维化模型；采用结扎左侧输尿管的方法构建小鼠单侧输尿管梗阻（Unilateral ureteral obstruction, UUO)诱导的肾脏纤维化模型。M I大鼠分别获取心肌梗死后1天，3天，7天，14天，28天心肌组织，于液氮中保存。Western B lot检测心肌TNAP及cx-SMA表达。U U O小鼠10天后处死并获取左侧肾脏组织。Western Blot及免疫组化检测肾脏组织TNAP表达。 结果：①心梗后左室α-SMA及TNAP表达随心梗时间有逐渐上调趋势。在心肌梗死后14天，心肌α-SMA、TNAP表达达到高峰，心梗后28天反而下降；②与假手术组相比，U U O组TNAP表达显著增髙(p<0.001)。 结论：TNAP在心、肾纤维化中表达上调，提示TNAP可能参与心脏及肾脏纤维化过程。 第二部分：抑制TNAP对心脏纤维化的影响 目的：探讨抑制TNAP对心脏纤维化的影响及可能机制。 方法：大鼠随机分为3组，每组8只：假手术组（Sham)、心肌梗死+盐水注射组（M I+Saline)和心肌梗死+TNAP抑制剂组（MI+Tetra)。在心梗前28天，给予大鼠Tetra(11 mg·kg-1·day-1)或等体积生理盐水腹腔注射，于心梗第14天处死。超声心动图检测心功能和心脏病理改变。Western blot方法测定 Collagen I，α-SMA, TGF-β1和TNAP表达。免疫组织化学染色方法检测心肌TNAP、α-SMA和TGF-β1表达。 结果：TNAP在心梗后心脏中表达增高，其分布与心梗后胶原增生分布区域一致(P＜0.05)。TNAP抑制剂（T etra)可显著抑制心脏TNAP表达，降低心梗诱导的胶原沉积、TGF-β1及α-SMA表达，同时改善心梗后心脏重塑及心功能改变，包括FS、EF、L V ID s以及IVSs(P均<0.05)。 结论：抑制TNAP可能通过抑制肌成纤维细胞转化及胶原合成的方式改善心肌纤维化，同时改善心梗诱导的心脏重塑及心功能变化。 第三部分：抑制TNAP对肾脏纤维化和钙化的影响 目的探讨抑制TNAP对单侧输尿管梗阻（UUO)小鼠肾脏纤维化和钙化的影响。 方法 SPF级C57BL/6雄性小鼠24只，随机分为3组，假手术组(n=8), UUO+生理盐水组（n=8)，UU0+Insl6组（n=8)。UUO模型建立后第10日处死小鼠，取术侧肾组织。采用天狼星红染色、Masson染色、茜素红S染色分别检测肾脏胶原沉积及钙化程度。Western Blotting检测肾脏TGF-β1，TNAP表达。免疫组织化学染色法检测肾脏TNAP表达。RT-PCR检测肾脏 TGF-β1、BMP2, C o lla l、Col2a1 mRNA表达。 结果与假手术组相比，UUO+生理盐水组肾脏胶原面积百分比显著增加，以I型胶原为主，钙盐沉积显著增加，TNAP，TGF-β1表达显著增加，TGF-β1、BMP2, C o l1a1、Col2a1 mRNA表达显著增加(P均<0.05)。与UUO+生理盐水组相比，UUO+Ins16组小鼠肾脏胶原面积，钙盐沉积，TGF-β1, TNAP, TGF-β1、BMP2, C o lla l、Col2al mRNA表达均显著降低（P均<0.05)。 结论采用 Ins16抑制TNAP具有抗U U O诱导的肾脏纤维化及钙化作用，其机制可能与调控TGF-β1、Collagen I、BMP2、Collagen II表达水平有关。