【摘 要】
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DNA损伤包括DNA分子发生的多种改变,具有重要的毒理学意义。DNA损伤的产生是化学致癌过程早期可检测的关键步骤,可以作为一种重要的暴露生物标记物,用于环境化学物的遗传毒性
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DNA损伤包括DNA分子发生的多种改变,具有重要的毒理学意义。DNA损伤的产生是化学致癌过程早期可检测的关键步骤,可以作为一种重要的暴露生物标记物,用于环境化学物的遗传毒性、生物个体环境暴露水平和肿瘤罹患危险度的评价。 DNA损伤的发生和分布不是随机的,不同基因甚或同一基因的不同碱基位点对损伤的易感性和修复能力有较大差异,其遗传学结果可能完全不同,损伤的检测有助于阐明致癌作用的分子机理。因此如果能采用某些灵敏的方法在核酸序列水平定位检测出一些与肿瘤发生相关的特定基因,如原癌基因和抑癌基因的DNA损伤,则具有非常重要的意义。 常规的DNA损伤检测方法较多,但它们都不能对特定基因进行DNA损伤直观或精确的定位检测。随着毒理学研究和分子生物学技术的发展,一些新技术不断出现。连接介导PCR(Ligation-mediated PCR,LMPCR)是一种用于DNA损伤与修复研究的技术,可以在核酸序列水平定位检测特定基因的DNA损伤,十余年来不断有相关的文献报道。依赖随机化末端连接物PCR(Randomized terminal linker-dependent polymerase chain reaction,RDPCR)技术,是我室在LMPCR等系列技术基础上加以改进而形成的新技术,理论上可定位检测任何阻止DNA聚合酶作用的损伤。本室已以p53基因为目的基因,成功地建立了
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