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目的：建立小鼠胚胎干细胞实验(EST)模型,验证该模型检测胚胎毒性的有效性,探讨aFGF的胚胎发育毒性及其对小鼠胚胎干细胞分化的影响。方法：体外培养小鼠胚胎干细胞,通过形态学观察、核型分析和碱性磷酸酶(AKP)染色等方法用于ES的鉴定,并按照欧洲替代试验方法验证中心(ECVAM)推荐的发育毒性评价方法,验证所建立的EST模型评价药物发育毒性的有效性；MTT法检测aFGF对ES细胞和BALB/c 3T3细胞增值的影响,RT-PCR半定量分析法检测aFGF对未分化基因Sox-2表达的影响,评价aFGF的胚胎毒性：并进一步采用RT-PCR方法测定不同剂量aFGF对ES细胞分化为外、中、内三个胚层过程中不同组织特异性分子标记物基因表达的影响,探讨aFGF较大剂量使用时,是否具有直接或潜在的胚胎发育毒性及致畸性,并用细胞免疫荧光检测分化的三个胚层特异性蛋白的表达量,以验证细胞分化的完整性。结果：(1)成功建立EST模型,5-Fu、DPH和Penicillin G细胞毒性检测结果表明,其胚胎毒性依次为强、弱和无,与临床药物毒性相一致。(2)aFGF(14-154)在0.01-100μg/mL范围内对3T3细胞和ES细胞呈不同程度的促增殖作用：当其大于100μg/ml时对ES细胞和3T3细胞均有不同程度的抑制作用：而在0.01-100μg/mL范围内对ES细胞的分化已经产生抑制作用。计算aFGF(14-154)对两种细胞增值及其对ES细胞分化的影响,结果显示分别为：IC50 3T3=263.786μg/mL, IC50 ES=393.12μg/mL,ID50 ES=6.42μg/mL,毒性评价结果为aFGF(14-154)具有弱胚胎毒性。(3)aFGF(14-154)在较低剂量下对外胚层标记物GFAP、Oligo2和Nestin基因表达有促进作用,并且都在1μg/mL aFGF时达到最高值,超过该剂量则促进作用下降；对中胚层各典型标记物BMP4、MHC和MyoD基因表达作用趋势不一致；而对内胚层标记物GATA6、TTR和ALB基因表达呈明显抑制作用。结论：依据本实验评价模型,aFGF的胚胎毒性判定为弱胚胎毒性,aFGF(14-154)对三个胚层特异性基因的表达的影响呈浓度依赖性,aFGF在同一剂量下对三个胚层的发育作用显示不一致甚至相反,其作用的不平衡性可能与其弱胚胎毒性相关；其中对内胚层标记物GATA6、TTR和ALB基因表达的抑制作用在判断aFGF的胚胎毒性中可能具有重要科学意义。