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细胞极性是指细胞内的形态、蛋白质的分布以及功能等的不对称性,是有机体行使各种正常生理功能(细胞的不对称性分裂、细胞的迁移、细胞的免疫、神经信号的传导等)重要基础。细胞极性的建立和维持对于胚胎和个体发育的过程是必需的,在病理条件下,丢失细胞极性会严重危害机体发挥正常功能形成肿瘤并且发生转移。在果蝇体内发现的第一个抑癌蛋白Lethal giant larvae(LgI),在建立细胞极性过程中发挥了重要的功能。Lgl在进化上具有很高的保守性,高等哺乳动物的同源蛋白mLgl也参与调节细胞极性,大量深入研究结果显示lg1的同源基因hugl-1,也起到抑癌基因的功能。Hugl-1在在多种常见的人类癌症例如,乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌、结肠癌以及黑色素瘤中被发现蛋白表达量的下调,而且结肠癌淋巴结的转移与Hugl-1蛋白表达下调相关,暗示了Hugl-1可能参与了肿瘤细胞的转移过程。为了研究Hugl-1在癌症中与肝癌发生发展的相互关系,芦雪峰等研究人员通过对80对肝癌组织和5株肝癌细胞株的hugl-1基因组序列和mRNA列比对分析发现32.5%(26/80)的肝癌组织及20.0%(1/5)的肝癌细胞株发生了频繁的异常剪辑,但是在对应的癌旁肝组织中并没有发现这些变化。芦雪峰等克隆并且表达了2个具有代表性的Hugl-1突变体Hugl-1/△1414-1567/1667-1959和Hugl-1/△1190-1508能够干扰内源的Hugl-1的生理功能(对肝癌细胞迁移和浸润具有促进作用,明显提高肝癌细胞在裸鼠体内的成瘤的能力；野生型的Hugl-1起到相反的作用)。但是Hugl-1是如何在肝癌的发生发展中的机理目前还不清楚。为了进一步了解Hugl-1在癌症发生发展中的作用,本论文成功的建立了研究细胞极性蛋白Hugl-1功能的Tet-On Advanced IndUcible Gene Expression System以及建立了可诱导的三维培养MDCK II细胞的系统。结果表明：在二维培养条件下,诱导表达Hugl-1的2个突变体Hugl-1/△1414-1567/1667-1959和Hugl-1/Δ1190-1508能够促进MDCK Ⅱ细胞迁移,野生型的Hugl-1/wt抑制MDCK Ⅱ细胞的迁移,说明Hugl-1不仅在肝癌细胞中起到抑癌基因的作用在MDCK Ⅱ细胞中也起到类似的功能,具有普遍的意义；在二维培养条件下,无论是突变体还是野生型的Hugl-1分布在胞浆和细胞膜上；三维培养条件下,Hugl-1的2个突变体Hugl-1/△1414-1567/1667-1959和Hugl-1/△1190-1508以及野生型的Hugl-1/wt主要定位于基底面和基底侧面并且和E-cadherin发生共定位。我们希望利用基因芯片技术筛选在稳定过表达Hugl-1/wt,Hugl-1／△1414-1567/1667-1959,Hugl-1/△1190-1508,Hugl-1/△153-1688细胞内基因表达水平的变化筛选与hugl-1相互作用的基因,我们建立了sk-hep1急定细胞株,为以后的实验做好了准备。