以普鲁兰产生菌—茁芽短梗霉6518 为原始菌株,探索并确定其原生质体制备的最佳条件为:菌体以1 % 的甘氨酸预处理;以0.1 mol/L pH 6.0 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,含0.7 mol/L NaCl 为高渗稳定液;经蜗牛酶0.2 %、纤维素酶0.1 %、溶菌酶0.2 % 的混合酶酶解15 min。采用He-Ne激光诱变茁芽短梗霉原生质体筛选得到高产变异株J208,其蔗糖转化率达到53.3 %,是原始菌株的10.6 倍。将变异株J208 发酵产生的多糖经乙醇沉淀、Savage 法、透析和Sephadex G-75 凝胶过滤柱层析进行纯化。纯化的多糖通过红外吸收光谱、13C 核磁共振波谱分析确定其结构为以α-1,6 糖苷键连接麦芽三糖构成的线性分子,即为普鲁兰。利用正交设计实验对变异株J208 发酵所需培养基进行优化,确定蔗糖50 g/L、酵母膏1 g/L、起始pH 7 为培养基的最佳组合,蔗糖转化率可高达62.4 %。