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目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPARγ)激动剂吡格列酮(pioglitazone,P io)对动脉粥样硬化模型载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠主动脉中热休克蛋白22(heat shock protein 22,HSP22)表达的影响,并探讨HSP22在其中所起的作用。方法:1、36只8~9周龄Apo E-/-雄性小鼠,随机分为4组:对照组(n=9,普通饲料),对照干预组(n=9,普通饲料+Pio),模型组(n=9,高脂饲料)与模型干预组(n=9,高脂饲料+Pio);对照组、对照干预组喂食普通饲料12周,模型组、模型干预组喂食高脂饲料12周,即高脂饮食(high-fat diet,HFD),其中干预组从第五周开始给予Pio(20mg/kg/d)干预处理,共干预8周。2、称量各组小鼠每周体重;检测各组小鼠基线及干预结束的血脂水平,包括:甘油三脂(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白-胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C);检测干预结束时小鼠的空腹血糖。3、主动脉整体油红O染色及苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色法观察各组小鼠动脉粥样硬化斑块形成情况及病理学变化。4、免疫组化法检测小鼠主动脉HSP22表达,Western Blot法检测PPARγ、HSP22、细胞间粘附分子1(intercellular adhesio n molecule-1,ICAM-1)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)、p-e NOS(ser1177)表达,ELISA法检测血清白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)浓度。结果:1、血脂、血糖变化(1)基线血脂:各组Apo E-/-小鼠的基线血清TG、TC、HDL-C、LDL-C的水平无差异(P>0.05);(2)干预结束时血脂:模型组和模型干预组小鼠血清TC、LDL-C较对照组及对照干预组明显升高(P<0.01),HDL-C显著降低(P<0.01),TG的变化无统计学意义。经Pio干预后,模型干预组小鼠血清TC、LDL-C较模型组明显降低(TC:P<0.05,LDL-C:P<0.01),HDL-C明显升高(P<0.01),TG的变化无统计学意义;对照干预组小鼠血清LDL-C较对照组显著降低(P<0.01),TG、TC、HDL-C无明显变化。(3)干预结束时血糖:经高脂饲料饲养后,模型组和模型干预组小鼠血糖较对照组及对照干预组明显升高(P<0.01);模型干预组较模型组无明显变化。2、组织病理学观察及分析(1)主动脉整体油红O染色:模型组和模型干预组小鼠主动脉红染脂质斑块多,其斑块相对面积明显高于对照组、对照干预组(P<0.01),而模型干预组较模型组减少(P<0.01);对照干预组较对照组有减少,但差异无统计学意义(P>0.05)。(2)主动脉根部HE染色:与对照组、对照干预组比较,模型组及模型干预组主动脉根部可见大量动脉粥样硬化斑块形成,其斑块相对面积显著增加(P<0.01),与模型组比较,模型干预组斑块面积减少(P<0.01)。3、Western Blot法检测主动脉PPARγ蛋白的表达模型组主动脉PPARγ的表达较对照组显著升高(P<0.01);而经Pio治疗后,模型干预组PPARγ的表达较模型组进一步升高(P<0.01),对照干预组PPARγ的表达较对照组进一步升高(P<0.01)。4、主动脉HSP22蛋白的表达(1)Western Blot法:模型组及模型干预组主动脉HSP22的表达较对照组、对照干预组显著升高(P<0.01);而模型干预组经Pio治疗后HSP22的表达较模型组降低(P<0.01);(2)免疫组织化学法:对照组及对照干预组主动脉内棕色着色浅,HSP22表达量少;模型组主动脉斑块及血管壁棕色着色深,HSP22大量表达;模型干预组与对照组相比,HSP22表达量也增加,但较模型组明显较少;5、Western Blot法检测主动脉e NOS、p-e NOS蛋白的表达模型组主动脉e NOS蛋白的表达较对照组、对照干预组显著降低(P<0.01),而模型干预组经Pio干预后,e NOS的表达较模型组升高(P=0.027)。模型组主动脉p-e NOS蛋白的表达较对照组降低(P=0.028)、较对照干预组显著降低(P<0.01);而模型干预组p-e NOS的表达较模型组显著升高(P<0.01)。6、Western Blot法检测ICAM-1蛋白的表达模型组及模型干预组主动脉ICAM-1的表达较对照组、对照干预组显著升高(P<0.01),给予Pio治疗后模型干预组主动脉ICAM-1的表达较高脂模型组降低(P<0.01)。7、血清IL-6水平模型组血清IL-6的浓度较对照组、对照干预组显著升高(P<0.01),而给予Pio干预后,模型干预组血清IL-6的浓度较模型组降低(P<0.01)。结论:1、高脂饮食可上调主动脉PPARγ、HSP22的表达,下调e NOS、p-e NOS的表达,上调ICAM-1的表达,促进动脉粥样硬化形成。2、吡格列酮可激活PPARγ,下调主动脉内HSP22的表达,上调e NOS、p-e NOS的表达,下调ICAM-1的表达,抑制动脉粥样硬化形成。