新生大鼠痉挛型脑瘫动物模型构建及评价的实验研究

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脑性瘫痪(cerebral palsy,CP)是威胁儿童健康最严重的神经系统疾病之一,其中60%~70%是痉挛型,因此痉挛型脑瘫(spastic cerebral palsy ,SCP)已成为当今实验及临床研究的重点。本实验构建一种SCP动物模型,以期最大程度地模拟SCP的神经行为学及病理形态学改变,并进一步探讨模型的评价方法。实验方法如下:将清洁级5日龄Wistar新生大鼠随机分为实验组和对照组,实验组结扎双侧颈总动脉,而对照组仅切开颈部皮肤。检测方法分为两个部分:第一部分,两组各取20只新生大鼠,分别于术前(P5)、术后1天(P6)、术后3天(P8)、术后7天(P12)及术后15天(P20)测量体重,于术后25天(P30)对其进行神经行为学检测,之后数据进行统计分析;第二部分,两组各取16只新生大鼠,分别在术后1天(P6)、术后2天(P7)、术后10天(P15)、术后20天(P25)对脑组织切片进行HE染色后行光镜观察。实验结果:①对照组存活率为100%(36/36),实验组存活率为85.71%(36/42)。②术后实验组大鼠体重增长较对照组缓慢,差异有统计学意义(P<0.05)。③行为学检测结果:悬吊试验中,实验组的时间为2.25±0.79分,对照组为4.15±0.67分;斜坡试验中,实验组的时间为12.25±1.21秒,对照组为3.35±0.93秒;旷场试验中,实验组的时间为4.30±0.92分,对照组为12.50±1.15分;拒俘反应试验中,实验组的时间为0.85±0.67分,对照组为4.80±0.77分;肌张力测试中,实验组为7.80±0.62分,对照组为9.90±0.46分;不自主运动测试中,实验组为9.50±0.89分,对照组为10.00±0.00分;以上各组试验结果进行统计学分析后得出P<0.05,表明两组差异有统计学意义。在倾斜板试验中,8只实验组大鼠两项都为阳性,另12只出现一项阳性,对照组无阳性反应。④HE染色光镜改变:实验组大鼠脑组织出现的主要病理改变为:小胶质细胞浸润;星形胶质细胞肥大、增生;脑白质结构稀疏、紊乱;脑室周围白质软化灶形成,囊间少突胶质细胞减少;侧脑室扩大且形态多不规则等,而对照组大鼠脑室周围白质形态未见异常,侧脑室大小正常。结论:①结扎5日龄新生大鼠双侧颈总动脉可成功构建痉挛型脑瘫动物模型;②与对照组大鼠相比,实验组大鼠术后体重增长缓慢,与临床实践中脑瘫患儿体重低于同龄正常儿童基本一致;③痉挛型脑瘫动物模型脑损伤的部位主要在白质,其发生与脑室周围白质损害密切相关。④该模型实用,对脑瘫的相关实验研究有进一步推广意义。
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