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血清白蛋白和DNA是具有重要生理功能的生物活性大分子,也是最常使用的生物模型,它们在生物体内可起到转运、贮存各种药物等小分子的作用。研究有机小分子特别是药物分子与血清白蛋白和DNA的相互作用,对了解其在生物体内的贮存状态、存在形式、药理功能及代谢具有十分重要的意义,同时为其药效评估和开发新型高效的药物提供了指导。本文利用光谱法对药物小分子与血清白蛋白和DNA间的作用机理进行了研究探讨,主要研究内容如下:1.利用荧光光谱法、紫外可见光谱等研究了Gli及SASP与牛血清白蛋白(BSA)的结合机制。通过不同温度下体系的猝灭常数推断猝灭机理;利用van t Hoff等热力学方程计算△Hθ及△Sθ的值判断结合的主要驱动力;采用同步荧光光谱和圆二色谱研究了药物对BSA结构的变化。结果表明,药物对BSA荧光猝灭以静态猝灭为主,同时伴随了能量的非辐射转移;猝灭过程中,△Hθ<0,△Sθ<0,药物与BSA结合的主要作用力为氢键和范德华力;结合过程中,药物改变了BSA的构象。2.用荧光光谱、分子荧光寿命及三维荧光光谱研究Ca2+、Fe3+、Mg2+存在下,格列齐特与BSA相互作用。结果表明,在金属离子作用下,其作用机制仍为静态猝灭;在相同条件下金属离子的存在,使BSA-Gli结合常数都有较大幅度的减小;由△Hθ<0,△Sθ<0,推出金属离子的存在,并没改变体系氢键和范德华力的作用类型;三维荧光光谱表明,金属离子的存在使两峰荧光强度发生进一步的猝灭,峰位发生不同程度的蓝移,引起蛋白质二级结构的变化。3.合成了辛伐他汀铈(Sim-Ce)和格列齐特铈(Gli-Ce)配合物,并应用多种光谱技术研究了与BSA的结合反应。根据所求得的结合常数、结合位点数及热力学参数,来推测猝灭机理和结合力类型;依据Forster量转移理论计算配合物与BSA的结合距离;并利用探针进行结合位点定位。结果表明,配合物对BSA的内源荧光猝灭主要以静态方式,同时发生非辐射能量转移;范德华力及氢键为主要结合力;Sim-Ce配合物和Gli-Ce配合物与BSA的结合距离分别为1.70nm和1.75nm;配合物在BSA分子的Site Ⅱ位结合。4.用Hill系数定量分析了Sim、Gli两种药物对BSA的协同作用,用同步荧光技术及圆二色谱确定了联合用药对BSA二级结构及构象的影响。结果表明:同一温度下,KA(BSA-Sim)>KA(BSA-Gli-Sim)、KA(BSA-Gli)>KA(BSA-Sim-Gli),且Hill系数nH<1;合用时同步荧光进一步蓝移,α-螺旋发生变化,对BSA二级结构产生影响。说明负协同作用的存在,负协同作用使体内游离态药物浓度升高,药效增强。因此,两种药物合用时需严格控制药量,这为临床联合用药提供了一定的理论指导。5.运用荧光光谱法、紫外可见吸收光谱法以及粘度法研究了Sim、Gli及SASP与ctDNA相互作用。讨论了不同温度下Sim.Gli及SASP与ctDNA结合的影响,并结合粘度法及盐效应探讨两者之间的结合机制。结果表明,药物对MB-ctDNA荧光增强的过程是一种静态增强过程,药物小分子ctDNA之间有较强的作用,其驱动力主要为氢键和范德华力,嵌插作用为主要的作用方式。