论文部分内容阅读
紫杉醇作为一种微管稳定剂可以促进微管蛋白的聚合并切断细胞分裂所需的能量,经临床研究发现,其对实体肿瘤的治疗卓有成效,如卵巢癌、乳腺癌、头颈肿瘤、非小细胞肺癌等。目前紫杉醇制剂有脂质体、环糊精包合物、紫杉醇前药、紫杉醇纳米粒及微球等。其中,两亲性聚合物胶束由于其作为药物载体表现出的优异性能已成为药剂学领域的研究热点。两亲性生物可降解材料PEG-PLA已被美国FDA批准应用于生物医学领域,且广泛应用于药物载体,如凝胶、纳米粒、微球等。然而目前以基于聚乳酸与聚乙二醇共聚物的载药胶束仍存在很多问题,如物理包埋药物时,载药量受药物分子与PLA疏水段之间的兼容性所限,载药量较低且释放较快。化学包埋药物时,采用酯键将PTX与PEG-PLA连接,虽然避免了药物的突释现象,但无法显著提高紫杉醇的载药量;采用叠氮-炔基点击化学合成紫杉醇载药胶束的方法虽然可以显著提高药物胶束的紫杉醇载药量,但其合成耗时长、过程复杂、合成过程中所用药品毒性较大,且释放速度较快,不能满足缓释要求。为了改善PEG-PLA作为紫杉醇药物载体应用中遇到的以上问题,本文首创采用化学包埋与立构复合作用相结合的方法,通过将PTX-PDLA-PTX与MPEG-PLLA相结合的途径得到MPEG-SCPLA-PTX载药胶束,制备方法简易,载药量可调,并符合缓释要求。具体为:1)采用人体内存在的绿色无毒生物质肌酐(CR)为催化剂,以MPEG为引发剂,反应温度150度,反应时间10-15h,引发L-丙交酯开环聚合,通过GPC、1H-NMR 表征,证明 MPEG2000-PLLA6000、MPEG5000-PLLA6000、MPEG5000-PLLA2000三种MPEG-PLLA双嵌段共聚物的合成。并对共聚物进行DSC表征与分析,得到了其熔点及熔融焓等热力学特性。2)采用人体内存在的绿色无毒生物质肌酐(CR)为催化剂,通过熔融缩聚,以D-乳酸为原料合成了数均分子量为2000Da的PDLA。然后以DMAP为催化剂,PDLA与丁二酸酐反应,合成了双羧基的DI-PDLA。最后以DCC和DMAP为催化剂,DI-PDLA与紫杉醇上的2-羟基反应生成了两端皆有PTX的聚合物PTX-PDLA-PTX,且通过1H-NMR与GPC证明了以上合成结果。并对以上聚合物进行DSC表征与分析,得到了其熔点及熔融焓等热力学特性。经lH-NMR与GPC数据分析计算PTX-PDLA-PTX中PTX负载率为36.36%,可知PTX的利用率为98.57%。3)将MPEG-PLLA嵌段与PTX-PDLA-PTX或DI-PDLA嵌段在溶液中反应形成MPEG-SCPLA-PTX结构,并进一步得到MPEG为亲水外壳,SC-PLA-PTX或SC-PLA为疏水内核的壳-核结构的载药胶束或空白胶束。其中,MPEG5000-PLLA6000、MPEG5000-PLLA2000、MPEG2000-PLLA6000 与 PTX-PDLA-PTX 反应得到 5-6 胶束、5-2 胶束、2-6 胶束;MPEG5000-PLLA6000 与 DI-PDLA 反应得到5-6空白胶束;所得载药胶束和空白胶束PLA段熔点比MPEG-PLLA双嵌段共聚物中PLA段熔点增高40-50℃,证实了立构复合聚乳酸结构的形成。其平均粒径均为100 nm左右。CMC为1.0×10-3-2.5×10-3g/L,其中2-6胶束的PTX负载率20.1%;5-2胶束的PTX负载率为11.7%,5-6胶束的PTX负载率为17.2%。结果表明通过改变共聚物中PDLA和PLLA的链长,可以调控紫杉醇负载率。另外在模拟人体环境中,2-6胶束、5-6胶束、5-2胶束216 h(9天)PTX累计释放百分数分别为37.7%、51.5%、52.0%。整个释放过程较为平缓,无突释现象发生,符合缓释要求。