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本文以海鱼弧菌、拟态弧菌、辛辛那提弧菌和创伤弧菌为研究对象,对初步研制的4种选择性鉴别培养基进行改进研究,设计出相应目的菌的改进型弧菌选择性鉴别培养基,并对改进前后培养基的特异性、灵敏度和准确性进行比较评价,希望在选择鉴别效果和检测成本等方面有所改进。 具体研究方法与研究结果如下: 1.改进型海鱼弧菌选择性鉴别培养基的研制 在初步研制的海鱼弧菌选择性鉴别培养基(VdSDM)的基础上,通过查阅大量相关资料,反复比对、分析、设计和实验研究,选择了海鱼弧菌特有酶系统、代谢特点和对某些抑菌物质的敏感性等特点作为设计依据,研制了一种改进型海鱼弧菌选择性鉴别培养基(imVdSDM)。评价试验显示:海鱼弧菌在imVdSDM上培养24 h,菌落呈紫色,其余弧菌以及非弧菌属细菌菌落呈黄色或24 h内不生长。imVdSDM对海鱼弧菌浓度为101 cfu/mL以上菌液的阳性检出率为100%,其特异性、灵敏度、准确性以及在实际样品检测等方面均明显优于改进前的VdSDM。 2.改进型拟态弧菌选择性鉴别培养基的研制 在初步研制的拟态弧菌选择性鉴别培养基(VmSDM)的基础上,通过查阅较多资料,反复比对、分析、设计和实验研究,选择拟态弧菌特有的酶系统、代谢特点和对特定抑菌物质的敏感性等方面特性作为设计依据,研制了一种改进型拟态弧菌选择性鉴别培养基(imVmSDM)。评价试验显示:拟态弧菌在imVmSDM上培养18 h,菌落呈紫色,其余弧菌以及非弧菌属细菌菌落呈黄色或24 h内不生长。imVmSDM对拟态弧菌浓度为101 cfu/mL以上菌液的阳性检出率为100%,其特异性、灵敏度、准确性以及在实际样品检测等方面均优于改进前的VmSDM,特别是显著降低了其经济成本,每平板(20 mL)配制成本从原来的5.58元降至0.33元,在实际检测使用imVmSDM检测拟态弧菌可有效提高检测效率,并大大降低检测成本。 3.改进型辛辛那提弧菌选择性鉴别培养基的研制 在初步研制的辛辛那提弧菌选择性鉴别培养基(VciSDM)的基础上,通过查阅较多资料,反复比对、分析、设计和实验研究,选择辛辛那提弧菌的代谢特点和对特定抑菌物质的耐受性等方面的特性作为设计依据,研制了一种改进型辛辛那提弧菌选择性鉴别培养基(imVciSDM)。评价试验显示:辛辛那提弧菌在imVciSDM上培养24 h,菌落呈黄色,其余弧菌以及非弧菌属细菌菌落呈绿色、蓝绿色或24 h内不生长。imVciSDM对辛辛那提弧菌浓度为101 cfu/mL以上菌液的阳性检出率为100%,相比改进前的培养基和传统的TCBS培养基,其特异性、灵敏度、准确性以及在实际样品检测中的表现均有明显改进。 4.改进型创伤弧菌选择性鉴别培养基的研制 在初步研制的创伤弧菌选择性鉴别培养基(VvSDM)的基础上,通过查阅较多资料,反复比对、分析、设计和实验研究,选择创伤弧菌的代谢特点和对特定抑菌物质的耐受性等方面的特性作为设计依据,主要针对初步研制的创伤弧菌培养基(VvSDM)配制价格较高的问题,设计了一种改进型创伤弧菌选择性鉴别培养基(imVvSDM)。改进后培养基的配制价格从每平板(20 mL)约5.72元降至约3.63元,一定程度上降低了检测成本,并且评价试验显示,改进前后的培养基对创伤弧菌的选择鉴别效果相当。 通过针对初步研制的系列弧菌选择性鉴别培养基的选择鉴别效果、检测成本等方面的不足而研制的4种改进型弧菌选择性鉴别培养基不仅提高了目的菌检测的特异性,并且一定程度上降低了检测成本,为致病性弧菌选择性鉴别培养基的推广应用奠定了基础。