随着化疗药物在恶性肿瘤疾病、自身免疫性疾病的使用,年轻女性患者的生存期延长,但同时也面临着化疗药物带来的卵巢早衰。这也是临床治疗的一大挑战。前期动物实验研究表明,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植能部分恢复化疗药物所致的卵巢损伤。但是治疗效果并没有达到预期,移植后细胞丢失是导致治疗效果欠佳的主要原因。因此如何提高移植细胞的存活率是提高疗效的关键所在。热休克预处理作为一种提高细胞抗凋亡能力的有效方法被深入研究。然而,各研究对于热休克预处理的条件没有得到一致的结论,且尚无研究探索热休克处理MSCs对化疗性卵巢早衰的疗效。因此,本实验设置4个MSCs热休克预处理条件,通过检测细胞凋亡得出最佳热休克处理条件,进一步明确该条件下MSCs的抗凋亡能力、细胞周期、增殖能力的变化。建立化疗性卵巢早衰大鼠动物模型,进行热休克预处理细胞移植,检测移植后卵巢结构和功能的变化,探究热休克预处理MSCs在化疗性卵巢早衰中的应用价值。方法分离、培养及鉴定大鼠骨髓间充质干细胞，42℃水浴热休克预处理间充质干细胞Omin、30min、1h、2h、3h,处理后24h、48h、72h检测细胞凋亡得出最佳热休克预处理条件;在该预处理条件下,CCK-8检测细胞增殖、流式细胞技术检测细胞周期、流式细胞技术检测热休克预处理后96h、120h、180h、240h的细胞凋亡。125只Wistar雌性大鼠随机分为5组:正常组,模型组,假手术组,MSCs组,热休克MSCs组。正常组不予处理,后四组以腹腔注射环磷酰胺建立化疗性卵巢早衰模型,建模结束后第一天,MSCs组及热休克MSCs组分别每侧卵巢各注射1×106MSCs、热休克预处理MSCs,假手术组则注射等量生理盐水。观察大鼠动情周期,各组均于实验前、移植后第1、15、30、45、60天采血检测血清雌二醇、卵泡刺激素水平,并在移植后第1、15、30、45、60天分批处死大鼠5只以观察卵巢结构、卵泡数量及卵巢颗粒细胞凋亡情况。结果MSCs在42℃热休克1小时处理后48小时细胞凋亡率明显低于未经处理的MSCs,并可持续至处理后120小时。MSCs经热休克预处理后S期细胞比例较未经处理间充质干细胞增多,而CCK-8结果提示MSCs经热休克处理后第2、3天增殖加快。细胞移植后热休克MSCs组部分大鼠恢复动情周期。细胞移植15天后,热休克MSCs组与MSCs组相比,卵巢颗粒细胞凋亡更少;30天后,热休克MSCs组雌二醇水平开始显著高于MSCs组,而卵泡刺激素水平则明显低于MSCs组;第45、60天,热休克MSCs组大鼠各级卵泡数均多于MSCs组。结论MSCs经42℃热休克预处理1小时后,其抗凋亡能力明显增强,并可持续至处理后120小时,且增殖能力加强。热休克预处理MSCs能更为有效地修复化疗损伤的卵巢结构及内分泌功能。