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白血病是一类造血干细胞异常增殖的恶性血液肿瘤，分为急性髓系白血病，急性淋巴系白血病，慢性髓系白血病，慢性淋巴系白血病。在年龄为0-14岁的孩童中，白血病是最常被诊断出的癌症类型，其人数占各类癌症总人数的35％，且白血病的发病率逐年呈上升趋势。目前，大部分急性髓系白血病不能得到很好的控制，存在治疗药物种类少、靶向性差、不能完全达到预期治疗效果等问题。因此，寻找并开发更为有效的白血病治疗药物、降低药物毒副作用、提高治愈率始终是白血病研究领域亟待解决的科学问题。Annexin A1是一种膜联蛋白，参与了体内多种病理生理过程。前期研究报道Annexin A1在多种肿瘤中呈现异常表达，可能参与了肿瘤的发生和发展。但目前未见AnnexinA1在髓系白血病中的相关研究报道。本论文将收集急性髓系白血病患者外周血样和正常志愿者外周血样，采用Western blot方法检测AnnexinA1在白血病患者外周血中的表达水平;通过构建Annexin A1敲降表达的急性髓系白血病细胞模型（选用KG-1a和HL60两种细胞系），在细胞和分子水平明确Annexin A1在急性髓系白血病增殖中的功能，并初步阐明其分子机制;采用已构建好的Annexin A1敲降表达的急性髓系白血病细胞模型以及亲本细胞构建荷瘤裸鼠模型，在动物水平对Annexin A1的功能进行进一步的研究。 本研究收集了2014年至2017年期间在浙江省人民医院接受住院治疗的37例白血病初治患者外周血作为研究对象，通过红细胞裂解方法提取白细胞，然后蛋白样品进行SDS-PAGE电泳后进行免疫印迹检测，研究结果显示，与正常人相比，白血病患者外周血白细胞中Annexin A1蛋白表达量显著高于正常人。在Annexin A1敲降表达的KG-1a和HL60细胞模型中，研究结果显示Annexin A1基因被干扰后，KG-1a和HL60细胞中的Annexin A1蛋白表达显著下调，与亲本和对应的空载细胞相比，KG-1a-shAnnexin A1和HL60-shAnnexinA1增殖速率明显降低，倍增时间明显变长，表明AnnexinA1蛋白有促进急性髓系白血病细胞增殖的功能。流式细胞术检测细胞周期，结果显示，Annexin A1敲降表达后促使KG-1a细胞周期阻滞在G0/G1期。细胞凋亡结果显示，AnnexinA1表达受干扰后不会促进细胞凋亡。Western blot结果显示，急性髓系白血病细胞KG-1a中的Annexin A1表达敲降表达后，Notch信号通路中的Notch1和p15蛋白的表达显著上调。通过进一步免疫细胞化学研究发现Annexin A1和Notch1在KG-1a和HL60细胞膜上共定位，免疫共沉淀实验结果显示在KG-1a细胞中Annexin A1和Notch1存在相互作用。考虑到Annexin A1敲降表达后会显著提高Notch1的表达水平，故我们推测AnnexinA1与Notch1的相互作用可能促进了Notch1在细胞内的降解。为了验证此假设，我们选用泛素化降解途径阻断剂氯喹(chloroquine)来处理KG-1a细胞，Western blot结果显示，经chloroquine刺激后，KG-1a细胞内Notch1表达量显著上调，提示在KG-1a中Annexin A1与Notch1相互作用后通过泛素化途径促进了Notch1的降解;且MTT实验结果显示chloroquine会时间和剂量依赖性地抑制KG-1a细胞增殖，提示在KG-1a细胞中经chloroquine处理后上调Notch1的表达会抑制KG-1a细胞增殖。在KG-1a细胞和KG-1a-shAnnexin A1细胞构建的荷瘤裸鼠模型中，与KG-1 a-shAnnexinA1组相比，KG-1a组成瘤率高，且瘤体体积增长快，而KG-1 a-shAnnexinA1组瘤体成瘤率低且易消退，瘤体体积增长缓慢，说明在动物水平上，Annexin A1敲降表达会抑制急性髓系白血病细胞的生长。