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目的去整合素-金属蛋白酶15(ADAM15,ADisintegrin And Metalloproteinase15)是近年来发现的一种与肿瘤密切相关的跨膜糖蛋白,本研究探讨抗人ADAM15抗体与肿瘤细胞的结合和抑制其增殖的生物学特性,初步研究其体内靶向定位能力。为应用抗人ADAM15抗体进行恶性肿瘤诊断和治疗提供新方法。方法(1)用Protein G免疫亲和层析法纯化抗人ADAM15多克隆抗体(anti-ADAM15抗体,由江南大学提供);(2)用间接ELISA法检测在孵育时间为2、24、48h和抗体浓度为0、2、4、8μg/ml的条件下该抗体与胃癌细胞株HGC-27、肺癌细胞株A549以及微血管内皮细胞株HMEC-1的结合情况;(3)用MTT法测定该抗体在抗体浓度为4μg/ml而孵育时间分别为48、72、96h的条件下对上述肿瘤细胞和血管内皮细胞增殖的抑制率;(4)建立胃癌细胞株HGC-27荷瘤裸鼠模型,用碘-125标记anti-ADAM15抗体并由尾静脉注射到荷瘤裸鼠体内进行放射免疫显像,评价该抗体在体内对肿瘤的靶向定位能力。结果1.抗体浓度为2~8μg/ml的条件下,anti-ADAM15抗体与三种细胞株结合的OD450nm均高于对照组,其结合程度随抗体浓度的增高而增强;孵育时间为24h或48h的结合程度明显强于2h。2.①该抗体在浓度为4μg/ml时对三种细胞株的增殖都有一定的抑制作用:当细胞培养时间为48和72h时,三种细胞株增殖测定OD490nm实验组与对照组相比均有明显下降;当培养时间为96h时,血管内皮细胞株HMEC-1OD490nm实验组与对照组相比明显下降。②当培养时间为48h时,anti-ADAM15抗体对胃癌HGC-27细胞及血管内皮HMEC-1细胞增殖抑制率高于肺癌A549细胞,抑制率分别为(25.74±5.93)%、(23.32±3.70)%、(13.68±4.33)%,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。③该抗体对胃癌HGC-27细胞及血管内皮HMEC-1细胞的增殖抑制率在培养时间为72h时低于48h,抑制率分别为(14.11±6.25)%和(17.81±4.11)%,差异具有统计学意义(HGC-27细胞组P<0.01,HMEC-1细胞组P<0.05)。3.125I-anti-ADAM15抗体标记率为(75.16±9.43)%,纯化后放射化学纯度可达(99.44±0.21)%。125I-anti-ADAM15抗体经尾静脉注入荷瘤鼠后,随时间延长T/NT逐渐增高,在48h肿瘤清晰显影,T/NT可达3.84±0.43。结论Anti-ADAM15抗体与胃癌细胞、肺癌细胞以及微血管内皮细胞均能有效结合,并且对肺癌细胞、胃癌细胞及血管内皮细胞的增殖有一定的抑制作用,125I-anti-ADAM15抗体在荷胃癌裸鼠体内具有肿瘤靶向定位能力。