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目的：
胃癌（gastriccancer，GC）是我国和全世界最常见的消化系统恶性肿瘤之一，也是导致癌症相关死亡的主要原因之一，发病率也呈现逐渐上升趋势，给家庭、社会带来了严重的经济和医疗卫生负担。近年来，随着规范化胃癌手术及综合治疗方法的不断进步，胃癌患者的整体诊疗质量的得到大幅提升。但由于胃癌发生发展过程中的复杂性，导致患者的五年生存率仍然较低，因此了解胃癌发病的生物学机制，对提高未来胃癌的治疗效果、早期诊断和预后等至关重要。
微小RNA（microRNA，miRNA）是一类从基因组上转录而来，但不编码蛋白质，长度约18到25个核苷酸的短链非编码RNA。miRNA主要在RNA水平上调节细胞蛋白质水平，从而参与和调节多种生理病理功能，包括细胞生长分化、胚胎发育、神经系统发育及肿瘤发生发展等。已有大量的研究发现，miRNA对胃癌的增殖、凋亡、迁移、侵袭以及化疗耐药等方面都起重要的作用，但目前miR-194-3p在胃癌中所起的作用仍无人研究，分析其在胃癌中的作用对进一步完善miRNA和胃癌之间的关系以及改善未来的诊断和治疗等均意义重大，同时本研究也具有很大的创新性。
本研究拟分析miR-194-3p在不同胃癌细胞系和为正常上皮细胞中的表达情况，同时利用基因沉默技术调节miR-194-3p在胃癌细胞系中的表达，进而研究miR-194-3p的变化对胃癌细胞的影响。
方法：
采用高通量测序分析miR-194-3p在癌和癌旁中的表达情况，同时提取TCGA（TheCancerGenomeAtlasproject）数据库和GEO（geneexpressionomnibusdatasets）数据库中miR-194-3p的表达情况以及预后信息进行统计分析。采用实时荧光定量PCR（rt-qPCR）检测六种胃癌细胞系（HGC-27，MKN-28，MKN-45，MGC-803，BGC-823，SGC-7901）和正常人胃上皮细胞（GES-1）中miR-194-3p的表达情况；使用慢病毒转染胃癌细胞系，分为miR-194-3p过表达组和空载组，使用rt-qPCR检测慢病毒转染效率；采用CellCountingKit-8（CCK-8）实验和克隆形成实验检测miR-194-3p对胃癌细胞系HGC-27和SGC-7901增殖能力的影响；流式细胞技术检测细胞凋亡；westernblot检测转染miR-194-3p后HGC-27和SGC-7901细胞中caspase3的表达量。
结果：
1.与癌旁组织相比，miR-194-3p在胃癌组织中显著高表达，且差异显著（P＜0.05）。此外，TCGA预后分析显示，miR-194-3p的高表达与良好的预后相关（P＜0.05）。
2.与正常GES-1相比，miR-194-3p在6种胃癌细胞系中均显著低表达（P＜0.05）。
3.CCK-8和克隆形成实验结果显示，与空载组相比，慢病毒转染过表达miR-194-3p后显著抑制胃癌细胞增殖（P＜0.05）。
4.流式细胞术显示miR-194-3p可显著促进胃癌细胞凋亡（P＜0.05）。
5.Westernblot结果显示caspase3的表达在miR-194-3p过表达的胃癌细胞中显著增加（P＜0.05）。
结论：
miR-194-3p在胃癌细胞中低表达，为抑癌基因，miR-194-3p的过表达可显著抑制为癌细胞的增殖，并促进细胞凋亡。其中miR-194-3p促进凋亡的能力可能与随后的caspase3过表达有关。
胃癌（gastriccancer，GC）是我国和全世界最常见的消化系统恶性肿瘤之一，也是导致癌症相关死亡的主要原因之一，发病率也呈现逐渐上升趋势，给家庭、社会带来了严重的经济和医疗卫生负担。近年来，随着规范化胃癌手术及综合治疗方法的不断进步，胃癌患者的整体诊疗质量的得到大幅提升。但由于胃癌发生发展过程中的复杂性，导致患者的五年生存率仍然较低，因此了解胃癌发病的生物学机制，对提高未来胃癌的治疗效果、早期诊断和预后等至关重要。
微小RNA（microRNA，miRNA）是一类从基因组上转录而来，但不编码蛋白质，长度约18到25个核苷酸的短链非编码RNA。miRNA主要在RNA水平上调节细胞蛋白质水平，从而参与和调节多种生理病理功能，包括细胞生长分化、胚胎发育、神经系统发育及肿瘤发生发展等。已有大量的研究发现，miRNA对胃癌的增殖、凋亡、迁移、侵袭以及化疗耐药等方面都起重要的作用，但目前miR-194-3p在胃癌中所起的作用仍无人研究，分析其在胃癌中的作用对进一步完善miRNA和胃癌之间的关系以及改善未来的诊断和治疗等均意义重大，同时本研究也具有很大的创新性。
本研究拟分析miR-194-3p在不同胃癌细胞系和为正常上皮细胞中的表达情况，同时利用基因沉默技术调节miR-194-3p在胃癌细胞系中的表达，进而研究miR-194-3p的变化对胃癌细胞的影响。
方法：
采用高通量测序分析miR-194-3p在癌和癌旁中的表达情况，同时提取TCGA（TheCancerGenomeAtlasproject）数据库和GEO（geneexpressionomnibusdatasets）数据库中miR-194-3p的表达情况以及预后信息进行统计分析。采用实时荧光定量PCR（rt-qPCR）检测六种胃癌细胞系（HGC-27，MKN-28，MKN-45，MGC-803，BGC-823，SGC-7901）和正常人胃上皮细胞（GES-1）中miR-194-3p的表达情况；使用慢病毒转染胃癌细胞系，分为miR-194-3p过表达组和空载组，使用rt-qPCR检测慢病毒转染效率；采用CellCountingKit-8（CCK-8）实验和克隆形成实验检测miR-194-3p对胃癌细胞系HGC-27和SGC-7901增殖能力的影响；流式细胞技术检测细胞凋亡；westernblot检测转染miR-194-3p后HGC-27和SGC-7901细胞中caspase3的表达量。
结果：
1.与癌旁组织相比，miR-194-3p在胃癌组织中显著高表达，且差异显著（P＜0.05）。此外，TCGA预后分析显示，miR-194-3p的高表达与良好的预后相关（P＜0.05）。
2.与正常GES-1相比，miR-194-3p在6种胃癌细胞系中均显著低表达（P＜0.05）。
3.CCK-8和克隆形成实验结果显示，与空载组相比，慢病毒转染过表达miR-194-3p后显著抑制胃癌细胞增殖（P＜0.05）。
4.流式细胞术显示miR-194-3p可显著促进胃癌细胞凋亡（P＜0.05）。
5.Westernblot结果显示caspase3的表达在miR-194-3p过表达的胃癌细胞中显著增加（P＜0.05）。
结论：
miR-194-3p在胃癌细胞中低表达，为抑癌基因，miR-194-3p的过表达可显著抑制为癌细胞的增殖，并促进细胞凋亡。其中miR-194-3p促进凋亡的能力可能与随后的caspase3过表达有关。