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脑出血是脑血管病危急重症之一,以其高发病率、死亡率和致残率成为当代严重危及人类生命和健康的第三大疾病。脑出血后产生的自由基等毒性产物攻击DNA和DNA损伤修复系统,两者共同参与脑出血后损伤的病理过程,保护DNA和促进DNA损伤修复通常可以减轻脑出血后的损伤。bFGF是神经营养因子,具有多种生物活性,可促进神经元的存活及突起生长,对神经起保护作用。为了探讨bFGF对大鼠脑出血后DNA损伤的修复机制,本课题从以下三个方面进行研究。1. bFGF对大鼠脑出血后DNA单、双链损伤的作用目的:观察bFGF对大鼠脑出血后DNA损伤的影响。方法:大鼠随机分为假手术组、生理盐水组和bFGF组,每组又根据观察时间不同分为1d、3d、7d组,采用胶原酶Ⅶ加肝素脑内定点注射建立脑出血模型。bFGF组按8μg/kg剂量肌肉注射,1次/d;NS对照组肌肉注射等剂量的NS;假手术组不作任何干预。各组分别于相应时间点取脑组织,然后分别应用彗星实验、TUNEL法测定大鼠血肿周围大脑皮层DNA的单链损伤和双链损伤。结果:①1d、3d bFGF治疗组大脑皮质神经细胞DNA损伤的迁移率比NS对照组显著减少(P<0.05);1d、3d和7d时bFGF治疗组大脑皮质神经细胞DNA损伤的迁移度比NS对照组明显减少(P<0.05)。②3d、7d时bFGF治疗组的大脑皮层神经细胞凋亡数比NS对照组有显著减少(P<0.05)。结论:bFGF可抑制脑出血后神经细胞DNA损伤和凋亡,减少大鼠脑出血后神经细胞的DNA损失,从而减少神经细胞的凋亡。2. bFGF对脑出血大鼠血肿周围大脑皮层XRCC1及PCNA蛋白表达的调节目的:观察bFGF对大鼠脑出血后血肿周围大脑皮层XRCC1及PCNA蛋白表达的影响,探讨bFGF对神经细胞DNA损伤的调控。方法:大鼠随机分为假手术组、生理盐水组和bFGF组,每组又根据观察时间不同分为1d、3d、7d组,采用胶原酶Ⅶ加肝素脑内定点注射建立脑出血模型。用免疫组织化学法测定XRCC1及PCNA蛋白的表达。结果:①血肿周围大脑皮层XRCC1蛋白的表达:1d和3d bFGF治疗组血肿周围大脑皮层XRCC1蛋白表达比NS对照组有所增加(P<0.05)。②血肿周围大脑皮层PCNA蛋白的表达:3d和7d,bFGF治疗组血肿周围大脑皮层PCNA表达比NS对照组明显增高(P<0.05)。结论:bFGF能调节DNA损伤修复相关蛋白,提高大鼠脑出血后大脑皮层XRCC1蛋白和PCNA蛋白的表达,减轻DNA的损伤,促进受损DNA的修复。3. bFGF对脑出血大鼠血肿周围大脑皮层XRCC1及PCNA基因表达的调节目的:观察bFGF对大鼠脑出血后血肿周围大脑皮层XRCC1及PCNA基因表达的影响,探讨bFGF对神经细胞DNA损伤的调控。方法:大鼠随机分为假手术组、生理盐水组和bFGF组,每组又根据观察时间不同分为1d、3d、7d组,采用胶原酶Ⅶ加肝素脑内定点注射建立脑出血模型。取血肿周围大脑皮层,用RP-PCR法测定XRCC1及PCNA mRNA的表达。结果:①血肿周围大脑皮层XRCC1mRNA表达:1d和3d bFGF治疗组血肿周围大脑皮层XRCC1mRNA表达比NS对照组明显增多(P<0.05)。②血肿周围大脑皮层PCNAmRNA表达:干预后3d bFGF治疗组血肿周围大脑皮层PCNAmRNA表达比NS对照组明显增高(P<0.05)。结论:bFGF能调节DNA损伤的修复相关基因,提高大鼠脑出血后大脑皮层XRCC1mRNA和PCNAmRNA的表达,减轻DNA的损伤,促进受损DNA的修复。