本研究以切花菊‘神马’为实验材料,采用农杆菌侵染法,对前人报道的各种再生转化体系进行了重复实验,发现在外植体再生过程中仍存在不稳定性。所以,本研究通过设置不同的外植体类型、苗龄、接种方式,以及不同植物生长调节剂浓度配比,系统分析了其对侵染后的菊花叶片愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,提高转化过程中的再生率,为菊花品种改良工作奠定基础,也为今后其他基因的转化研究提供参考依据。主要结论如下:1.确定了切花菊‘神马’的最佳消毒方式。切花菊‘神马’茎段外植体的最佳灭菌处理为75%酒精溶液浸泡30s,无菌水冲洗1遍,再用20%次氯酸钠溶液消毒3min30s,最后用无菌水冲洗2遍。2.从四方面提高了切花菊‘神马’在转化过程中的再生率。苗龄、外植体类型和不同浓度配比的植物生长调节剂均会影响切花菊‘神马’在遗传转化过程中的再生情况。对于苗龄的选择,待无菌苗长大后,随苗龄的增大,叶片的再生能力逐渐减弱,二者呈现负相关关系。以苗龄25天的无菌苗为最佳,出愈率为98%,出芽率为24.5%。对于外植体的选择,叶柄和叶片的愈伤组织诱导能力均在95%以上,但叶柄的愈伤组织分化能力明显高于叶片,叶柄的出芽率为46.9%,叶片的出芽率为22.9%,叶柄出芽率为叶片的两倍。在不同浓度配比的生长调节剂选择上,切花菊‘神马’叶片的最佳诱导愈伤和分化培养基为MS+2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,出愈率为98%,出芽率为30%。对于叶片接种方式,不管是近轴面朝上接种还是近轴面朝下接种,叶片在诱导愈伤和分化不定芽的过程中并没有显著区别。3.获得了转基因植株。共获得34株转SVP基因的抗性植株,使用PCR法对抗性植株进行检测后,成功获得10株转基因阳性植株。