鲤鲫杂交和鲤鱼雌核发育子代的同工酶及DNA的遗传分析

来源 :天津师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:qqqq406340142
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本研究进行了四个组合的鲤鲫杂交试验,应用同工酶检测技术对子代进行分析,推测了分别以鲤鱼和鲫鱼为母本、乌龙鲫二倍体和四倍体为父本产生三倍体的原因;应用远缘杂交诱导鲤鱼雌核发育以及用紫外线灭活精子使鲤鱼卵受精、人工诱导雌核发育,应用微卫星DNA和RAPD分子标记鉴定雌核发育是否成功,并判断所诱导的雌核发育属于阻止第二极体排出型还是阻止第一次卵裂型雌核发育二倍体。1、利用水平式淀粉凝胶电泳法对乌克兰鳞鲤((?))×乌龙鲫四倍体((?))、红鲫((?))×乌龙鲫四倍体((?))、红鲫((?))×乌龙鲫二倍体((?))和白鲫((?))×墨龙鲤((?))四组鲤鲫杂交子代的背侧肌肉组织的天冬氨酸转氨酶(AAT)、α-甘油醛磷酸脱氢酶(a-GPD、葡萄糖磷酸异构酶(GPI)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和肌浆蛋白(PROT)进行了电泳分析,并测量了红细胞长径。红细胞测量结果表明乌克兰鳞鲤((?))×乌龙鲫四倍体((?))、红鲫((?))×乌龙鲫四倍体((?))、红鲫((?))×乌龙鲫二倍体((?))杂交子代为三倍体,白鲫((?))×墨龙鲤((?))杂交子代为二倍体。四组杂交子代GPI同工酶的基因组成结果表明,父本乌龙鲫四倍体和父本乌龙鲫二倍体都产生二倍体配子,且二倍体配子中一套为鲤染色体组,一套为鲫染色体组。2、应用大口胭脂鱼雄鱼精子为远缘精子诱导了六个雌性鲤鱼(分别为禾花乌鲤雌核发育Fl(禾花乌鲤(?)×大口胭脂鱼(?))、乌克兰鳞鲤雌核发育F1代(乌克兰鳞鲤(?)×大口胭脂鱼(?))、贝尔湖鲤、松浦鲤、禾花乌鲤和乌克兰鳞鲤)的雌核发育,应用紫外线照射后遗传失活的精子诱导一组津新鲤雌核发育。其中禾花乌鲤雌核发育F1((?))×大口胭脂鱼((?))组、乌克兰鳞鲤雌核发育F1代((?))×大口胭脂鱼4((?))组、贝尔湖鲤((?))×大口胭脂鱼((?))组及津新鲤雌核发育组均获得了正常二倍体子代。利用8对微卫星引物,对三个鲤鱼为母本的远缘杂交雌核发育组和津新鲤雌核发育组的正常二倍体子代及亲本进行分析,并计算重组率。检测结果表明,四组雌核发育子代的基因均来自母本,均为母本的雌核发育类型;且四个雌核发育组合的幼苗部分个体都存在杂合,表明基因座位与着丝粒间有交叉交换现象。津新鲤雌核发育组(分析了48个个体)的8个基因座位上,MFW19座位上的重组率最低,重组率为1.20%,HLJ1118座位的重组率最高,重组率为85.70%。由此可以认为MFW19座位与着丝粒的距离最近,HLJ1118座位与着丝粒的距离最远。微卫星DNA分析结果表明两种方法诱导的雌核发育均属于阻止第二极体排出型雌核发育二倍体。利用20个随机引物对津新鲤雌核发育组的20尾子代及亲本进行RAPD检测,OPA02和OPA19两个引物扩增出的RAPD结果显示父本1和父本2具有特异的扩增条带,母本与子代均未出现,20尾子代均为津新鲤的雌核发育类型,与微卫星检测结果一致。
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