竹屑多糖的提取分离纯化研究

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我国竹资源丰富,素有“竹子王国”之称。现今,国内外竹资源的研究非常活跃。竹子中有效活性物质的开发,备受关注。竹屑作为竹子的重要组成部分,目前大多被视为废弃物,然而其是否也同竹叶、竹笋等类似,包含各种潜在的生物活性成分,值得探讨。竹多糖是竹子中一类重要的具有较好生物活性的大分子物质,有抗氧化、降血脂、降血糖等药用价值。因此开发竹屑多糖资源,研究其提取分离纯化工艺参数,确定其生物活性功能及作用机理,将为竹屑多糖在工业中得到进一步的推广与应用提供一定的理论基础。本论文选用竹屑为原料,以竹屑多糖为目标产物,探讨了水提法、微波法和超声波法提取竹屑多糖的工艺条件,确立了竹屑多糖的最佳提取方法及优化工艺条件;并对粗多糖进行了脱蛋白、脱色工艺研究;对竹屑多糖的理化性质、抗氧化性进行了初步探讨。本文旨在为竹资源的综合开发与竹屑多糖的功能性研究提供基础理论依据。主要研究内容与结果如下:(1)竹屑多糖的提取。选取蒽酮-硫酸法测定竹屑多糖含量。研究了水提法、微波法和超声波提取法三种提取工艺对竹屑多糖得率的影响。结果如下:水提法的优化工艺条件是:料液比1:15,温度85℃,提取时间2.5h,此条件下,竹屑多糖的得率可以达到2.278mg·g-1;超声波提取法的优化工艺条件是:料液比1:20,时间30min,温度65℃,功率为总超声功率的60%(即180W),此条件下,竹屑多糖的得率可以达到1.484mg·g-1;微波提取法的优化工艺条件为:料液比为1:12,功率为700W,时间为8min,竹屑多糖的得率可以达到2.026mg·g-1。上述数据表明:水提法相比其他两种方法具有较高的得率且有简单易操作、节约能源等优点,故本文选用水提法对竹屑多糖进行提取。(2)竹屑多糖的纯化。对竹屑多糖进行了脱蛋白、脱色工艺的研究,并对纯化条件进行了优化。本实验采用以三氯乙酸法为代表的化学法和以木瓜蛋白酶法为代表的酶法对竹屑多糖进行脱蛋白的工艺研究,并尝试采用三氯乙酸和木瓜蛋白酶法联用的新型方法进行多糖的蛋白去除,研究结果发现:三氯乙酸-木瓜蛋白酶联用的方法脱蛋白效果最好,且多糖的保留率也相对较高,此方法蛋白脱除率达到96.706%,多糖的保留率为95.480%。竹屑多糖脱色工艺研究:采用活性炭法、双氧水法、AB-8大孔树脂法进行了脱色工艺的研究。综合考虑脱色率和多糖保留率后得出:AB-8大孔树脂法脱色效果较好,并在此基础上对其脱色工艺条件进行了优化,结果显示在脱色时间1h,用量9g,温度35℃,pH值为5.5的条件下竹屑多糖脱色率可以达到86.150%,多糖的保留率为94.400%。(3)竹屑多糖的理化性质和结构分析。对纯化后的竹屑多糖进行了理化性质研究和红外光谱测定,结果表明:竹屑多糖是不含蛋白质与酚类物质,含有糖醛酸的非淀粉类多糖。紫外光谱测定结果显示:竹屑多糖组分不含核酸与蛋白质。通过红外光谱分析,了解了竹屑多糖的基本构成,其糖链中单糖主要组成可能为α-吡喃糖。(4)竹屑多糖的抗氧化活性研究。对竹屑多糖进行了体外抗氧化实验的分析,研究表明:竹屑多糖对DPPH·和·OH自由基具有良好的清除能力,且随着多糖浓度的增加清除能力增强,竹屑多糖的总抗氧化能力与浓度呈现正相关的关系,随着浓度的增大,抗氧化能力逐渐增强。结果表明竹屑多糖具有一定的抗氧化性。
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