近些年来,丝绸的起源和传播得到了越来越多的研究学者关注,然而这一直是考古学界的一个未解之谜。蚕丝在种类上可以分为桑蚕丝、柞蚕丝、蓖麻蚕丝和栗蚕丝等,不同种类的蚕丝具有不同的结构和性能,以不同蚕丝为原料经过一系列工艺流程得到的丝绸样品也具有不同的形貌和结构,分析不同蚕丝种属以及不同文物样种属鉴定对研究丝绸的起源和传播具有重要意义。本论文通过采用蛋白质组学的方法分析现代蚕丝样品,获得不同种属蚕丝的标志性蛋白,建立基于蛋白质组学分析蚕丝种属鉴定的方法;通过分析不同蚕丝的氨基酸序列,选取特征肽段作为半抗原,偶联载体蛋白以获得具有免疫原性的完全抗原,通过动物免疫的方法制备抗体,建立基于免疫学原理的蚕丝种属鉴定方法;在此基础上继续分析老化样品,从免疫学的角度研究样品老化机理,为古代丝绸鉴定的研究提供理论基础。首先,采用铜乙二胺溶液提取不同蚕丝中的丝素蛋白,使用溶液内酶切的方法将蛋白酶解,利用超高效液相色谱串联质谱分析酶解之后的蛋白质,获得不同种属蚕丝的标志性蛋白。桑蚕丝标志性蛋白:编码为P05790和P21828的蛋白;柞蚕丝标志性蛋白:编码为O76786的蛋白;蓖麻蚕丝的标志性蛋白:编码为A0A0D5ZY13的蛋白;栗蚕丝的标志性蛋白:编码为B6ZIV6蛋白。将所建立起来的蛋白质组学方法应用到古代丝绸种属的鉴定上,可以有效的找到文物样样品中的标志性蛋白,从而确定文物样的种属。在蛋白质组学的研究基础上,分析不同种属蚕丝的氨基酸序列,获得桑蚕丝和柞蚕丝的特征肽段,制备针对桑蚕丝和柞蚕丝的不同抗体(兔抗桑蚕丝素蛋白序列抗体和兔抗柞蚕丝素蛋白序列抗体),同时使用桑蚕丝素蛋白粉末作为完全抗原制备兔抗桑蚕丝素蛋白抗体和鼠抗桑蚕丝素蛋白抗体,通过免疫印迹(Western Blot)的方法将桑蚕丝从其它种属蚕丝中区分开来,继续使用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELSIA)的方法鉴别桑蚕丝和柞蚕丝,最终可以有效将桑蚕丝和柞蚕丝区分开来。将两种抗体应用到文物样的种属鉴定上,成功确定文物样种属,且结果与蛋白质组学检测结果相同。采用柞蚕丝素蛋白粉末为完全抗原,通过动物免疫的方法制备针对柞蚕丝的兔抗柞蚕丝素蛋白抗体,采用热老化和碱老化的方法获取老化柞蚕丝,将建立起来的免疫学的方法应用到老化样品的检测中,同时结合常规检测方法,分析柞蚕丝老化机理。发现碱老化比热老化对柞蚕丝的破坏程度高;检测柞蚕丝老化样品时,ELISA比Western Blot的方法更灵敏。综合上述研究,本课题建立了古代丝绸文物样品的蛋白质组学和免疫学鉴定体系。这一体系的建立为古代丝绸样品的鉴定提供了新的分析方法,也为丝绸的起源和传播研究提供了新的探索思路。