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目的:本实验旨在通过复制大鼠前列腺增生模型,观测加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺增生组织MVD计数及其组织结构变化的影响,来评估前列腺增生组织新生血管密度及其组织结构相关改变,加以探讨具有补肾益气活血化瘀之法的加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺增生的疗效,为以后中医药治疗BPH发展方向提供相应的实验依据。
方法:健康雄性SD大鼠60只,7-8周龄,体重120-260g;由广西医科大学动物实验中心提供(SCXK桂2009-0002)。采用SPSS随机数字表法随机将60只大鼠分为4组,正常对照组(A组);增生空白组(B组);加味桂枝茯苓颗粒组(C组);非那雄胺对照组(D组);每组15只。在无菌操作条件下,增生空白组(B组);加味桂枝茯苓颗粒组(C组);非那雄胺对照组(D组)分别给予切除睾丸去势法,待第8天伤口愈合后继续连续给予颈背部皮下注射溶于橄榄油的注射用丙酸睾丸酮(5mg·kg-1·d-1)25天,制成前列腺增生大鼠模型(通过正常对照组和空白增生组取样比较,计算前列腺增生指数证明造模成功)。25天后,正常对照组不施加任何给药措施;增生空白组大鼠给予生理盐水2ml灌胃每天一次,加味桂枝茯苓颗粒组大鼠给予加味桂枝茯苓颗粒浸泡液(2ml··d-1);非那雄胺组大鼠给予非那雄胺饱和溶液(2ml··d-1)灌胃,以上4组均连续灌胃28d,给药期间每周称体重1次以调整剂量。实验第60天,称其重量,然后全部以断颈法处死实验大鼠,剖腹仔细分离后摘除前列腺,取前列腺组织为所需实验样品;用ACS-3A型电子计重称称大鼠的体重,用AR2140电子分析天平用称大鼠前列腺重量,以上单位均为:g,并计算前列腺指数(前列腺指数=前列腺湿重/体重×100%);置入装有10%福尔马林溶液的密闭容器里储存备用,行组织病理学检查;利用CD34的表达测量前列腺标本微血管密度(MVD)并计数;常规病理切片HE染色,光镜下观察前列腺间质和腺体成分、腺上皮形态,间质情况等。
结果:(1)B组大鼠前列腺湿重、前列腺指数、MVD计数均明显高于A组,表明造模成功;(2)C组和D组与B组比较前列腺的两项观察指标均明显降低(P<0.05),即加味桂枝茯苓颗粒和非那雄胺对BPH的治疗有着类似的疗效。(3)HE染色片在光镜下观察表明:A组腺体排列清楚,上皮呈单层柱状,腺腔无扩张,腺体间可见明显的间质;B组腺体排列明显密集,小部分区域呈假复层,腺腔稍扩张;C组腺体排列少密集,小部分区域呈假复层,腺腔稍扩张;D组腺体排列稍密集,小部分区域形成低乳头突向腔内,腺腔稍扩张(4)B组MVD表达水平相对A组明显提高,且C、D组的MVD表达水平与B组比较均有显著差异(P<0.05)。
结论:本实验表明1)、加味桂枝茯苓颗粒通过减少MVD计数,降低前列腺指数,缩小前列腺体积,达到抑制前列腺增生。2)、加味桂枝茯苓颗粒通过改善腺体排列密度,减少乳头状结构数量,抑制前列腺腺上皮的增生及腺腔的扩张,达到抑制前列腺增生目的。3)、加味桂枝茯苓颗粒对BPH动物有良好的治疗效果。