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背景与目的：蛋白酶激活受体3(protease-activated receptor-3，PAR3)属于G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor，GPCR)家族成员，由细胞外区(N—末端和细胞外袢)、跨膜区(7个跨膜螺旋)及细胞内区(细胞内袢和C—末端)组成。PAR3存在于单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞等，广泛分布在心脏，肝脏，胰腺，胸腺，小肠，胃，淋巴结，气管，肾上腺和骨髓等各种组织，参与炎症、肿瘤等疾病。制备hPAR3抗体，有利于检测PAR3的表达，深入了解其在疾病中的作用。鉴于我国国情，研制效价高，特异性好的PAR3单克隆抗体(mAb)，具有重要意义。方法：以hPAR3为免疫原免疫BALB／c小鼠，取免疫小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选可特异性分泌抗hPAR3 mAb的杂交瘤细胞。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类；通过ELISA、免疫组织化学染色、流式细胞分析、激光共聚焦扫描显微镜、Dot blot等技术鉴定mAb的特异性。结果：获得2株可稳定分泌抗hPAR3 mAb的杂交瘤细胞，其分泌的mAb均为IgM。免疫组化染色表明，mAb与肺中的巨噬细胞，结肠中的淋巴及疑似肥大细胞，扁桃体和包皮组织的淋巴细胞呈阳性反应。流式细胞仪分析及激光共聚焦扫描显微镜观察显示，2株mAb与人肺腺癌细胞系A549细胞上的PAR3呈阳性反应。Dot blot分析表明，其mAb能与转印至NC膜上的PAR3Ag有效结合。结论：成功地制备抗hPAR3 mAb，为研究PAR3的表达，作用及其相关工作提供了有用的试剂。