论文部分内容阅读
本研究采用稀释平板法、病原菌诱捕法从温室土壤中的10份土样中分离到59个木霉菌株。获得了具有明显生防潜能的哈茨木霉T25菌株。该菌株具有拮抗谱广、拮抗作用强、生长速度快、产孢量大,盆栽防病效果好等特点。
通过形态学观察鉴定木霉菌T25为绿色木霉Trichoderma atroviride。通过rDNA-ITS1序列分析,T25的rDNA-ITS1序列片段与genebank数据库中所有序列片段比较,发现T25的rDNA-ITS1序列与T. atroviride的序列同源性最高(98%),与形态学鉴定结果一致。
研究发现T25菌株生长迅速在PDA培养基上生长最好。温度对T25菌株菌丝生长和孢子产生影响显著,30℃时菌丝生长最快,25℃时产孢量最大。T25在pH值2~10范围内均可生长,pH值5~6时生长最快,pH值为6时孢子产生量最大。光照处理对茵丝生长影响显著,并且明显促进孢子产生。淀粉、蔗糖分别为菌丝生长和产孢的最佳碳源。硫酸铵和蛋白胨为菌丝生长和产孢的最佳氮源。不同维生素对菌丝生长和孢子产生的作用不同,VB<,1>+VH、VB<,6>对菌丝生长和产孢最有利。微量元素对菌丝生长有一定的促进作用,Ca<2+>有利于孢子的产生。在PDA膜上,T25菌株的孢子从8h以后开始萌发,16h萌发率达到100%。
在T25与 Botrytis cinerea strain Bo-Ci 的对峙培养过程中发现木霉菌生长快于Botrytis cinerea,两种菌接触后Bo-Ci生长停止。随后,木霉菌继续生长,覆盖灰霉菌的菌落并大量产孢。显微观察发现T25菌丝首先向Bo-Ci趋性生长,然后紧贴灰霉菌菌丝平行生长或穿入菌丝生长,最后灰霉菌菌丝瓦解。
对T25的抗生作用试验表明离体条件下T25菌株的抗生作用不大。发酵原液对Bo-Ci菌丝生长和孢子萌发均无抑制作用,但T25的挥发性物质对病菌孢子萌发具有一定的抑制作用,尽管抑制率还不到10%。含有T25分泌物的培养基对病菌孢子萌发有很强的抑制作用,抑制率高达75.06%。
本文研究了喷洒木霉菌发酵液后番茄叶片PO,PPO,PAL,SOD活性的变化,以及PO,SOD同工酶谱带的变化。研究发现在第三天以后,处理后的叶片分别规律性的出现了酶活高峰,这说明了发酵液激发了植物防御酶系的防卫反应,这暗示着系统诱导抗病性(SAR)的发生。