【摘 要】
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目的:通过观察茯苓丸加减方对日本大耳白兔膝骨性关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)模型的软骨组织形态学的影响及关节液中的基质金属蛋白酶MMp-3、MMp-13及其抑制剂TIMp-1表
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目的:通过观察茯苓丸加减方对日本大耳白兔膝骨性关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)模型的软骨组织形态学的影响及关节液中的基质金属蛋白酶MMp-3、MMp-13及其抑制剂TIMp-1表达水平的变化,进一步加深对KOA的病变过程的学习和认识,进而对茯苓丸加减方治疗KOA的作用机理进行探讨,为临床上KOA的防治工作提供理论依据。材料与方法:将28只日本大耳白兔称重且统一编号后随机分成正常组,模型组,茯苓丸加减方组(即实验组)和双氯芬酸钠组(即对照组)四组,每组7只,其中正常组不做处理,其余三组的21只日本大耳白兔均取左后膝关节参照改良Hulth法进行手术造模,造模两周后各组随机抽取一只日本大耳白兔评估造模情况,评估显示手术造模成功后,严格依照实验设计进行药物干预治疗。正常组与模型组每只予蒸馏水5ml/d灌胃;茯苓丸加减方组每只给予生药量为10.22g的常规煎服汤剂5ml/d灌胃;双氯芬酸钠组每只予10.4mg双氯芬酸钠溶于5ml/d蒸馏水中灌胃;对各组的日本大耳白兔进行连续灌胃给药4周,治疗期间注意观察各组的日本大耳白兔的行为学变化,对手术局部进行观察并记录,若出现异常情况及时进行处理。4周的干预治疗结束后给予各组日本大耳白兔空气栓塞处死,运用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色法借助光镜对滑膜软骨组织形态学进行观察,抽取日本大耳白兔的膝关节液并对其中的MMp-3、MMp-13、及TIMp-1的水平进行ELISA法检测。结果:1.观察日本大耳白兔的膝关节软骨组织并进行评分发现:模型组的OARSI评分高于正常组,p<0.05,数据具有统计学意义。茯苓丸加减方组和双氯芬酸钠组评分均低于模型组,p<0.05,具有统计学意义。茯苓丸加减方组的和双氯芬酸钠组比较,p>0.05,无统计学意义。2.模型组、茯苓丸加减方组和双氯芬酸钠组的日本大耳白兔膝关节液中MMp-3、MMp-13和TIMp-1水平较正常组显著增加,差异有统计学意义(p<0.01);茯苓丸加减方组和双氯芬酸钠组的日本大耳白兔膝关节液中MMp-3、MMp-13和TIMp-1水平较模型组显著降低,差异有统计学意义(p<0.01)。茯苓丸加减方组日本大耳白兔膝关节液中MMp-3、MMp-13和TIMp-1水平略低于双氯芬酸钠组,差异不具有统计学意义(p>0.05)。各组之间的MMp-3/TIMp-1和MMp-13/TIMp-1相比较均无统计学差异,(p>0.05)。结论:1.本实验应用改良Hulth法制备日本大耳白兔的膝KOA模型的方法可取;2.茯苓丸加减方可以显著的降低日本大耳白兔KOA模型的关节液中的MMp-3、MMp-13和TIMp-1的含量,从而对日本大耳白兔KOA模型起到治疗作用,此三种指标水平的降低可能是茯苓丸加减方治疗KOA的机理之一。。3.大体观察评分结果提示茯苓丸加减方能在一定程度上改善日本大耳白兔KOA的诸多症状表现,对关节软骨有保护作用。
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