钩端螺旋体病是我国危害最大的鼠传疾病之一，其发病高峰时期患病人数多达十万，虽然近几年国家高度重视将发病率控制在几千至几万人之间，但仍对人类健康造成严重的危害。近年来我国经济的快速发展，国内外经济贸易和人口的往来日益频繁，加剧了钩端螺旋体病等鼠传疾病的传播。鉴于鼠传疾病的持续高发，我国重点地区有计划地开展鼠类监测和病原学检测，这项措施对于尽早检出疫情、及时控制起到了积极的作用。但目前监测现场使用的检测试剂绝大部分是进口试剂，而且是多套试剂，重复采样，分别进行检测，操作相对繁琐，且成本较高。传统的微生物检测需要对细菌或病毒涂片、培养，需经数小时或数天检测，操作繁琐复杂，技术要求高。酶联免疫分析法(EIA)、放射免疫分析法(RIA)、荧光分析法(FIA)和化学分析免疫发光法(CIA)等检测方法与传统检测方法相比较，虽然操作过程简单快速，但也需几小时，并且对操作人员的技术能力要求很高。胶体金免疫层析技术(GICA)是一种固相标记免疫检测技术，这种技术是把胶体金层析方法、颗粒标记、免疫检测等技术放在一起的一种技术。具有操作简单快速，不需要特殊的仪器，适合现场快速检测。因此本实验的研究对钩端螺旋体病的检测具有极高应用价值。本研究对钩端螺旋体(Leptospira；LP）的抗原表位进行筛选，并构建了原核表达载体pET-20b-rLP，对目的蛋白进行了表达、纯化；通过酶联免疫吸附实验（ELISA）检测鉴定其蛋白的活性。用纯化后的rLP蛋白免疫家兔，制备多克隆抗体，最后制备胶体金溶液，确定其最佳pH值及最适抗原标记量。研究结果，在大肠杆菌中rLP蛋白得到高效表达，纯化后rLP蛋白经SDS-PAGE电泳出与设计相符合的蛋白条带，应用间接酶联免疫吸附实验法检测具有很好的活性；应用rLP蛋白免疫家兔获得了多克隆抗体，酶联免疫吸附实验检测结果显示多克隆抗体的效价稳定，并且能与rLP抗原能很好的结合；最后制备出胶体金溶液（直径40nm的），确定了其最佳pH值为7.0及最适抗原标记量为100μg/mL。