刺五加[Acanthopanax senticosus (Rupr.et Maxim)Harms]为五加科落叶灌木,是一种传统的药用植物。近年来,由于不合理采摘,刺五加的数量急剧减少,其已被列入保护植物。体细胞胚胎发生过程被视为研究植物胚胎发育机制的最适模型。研究刺五加体细胞胚胎发生与发育对阐明五加科植物发育、木本植物快速繁殖、人工种子的基础理论研究具有重要意义。本实验以刺五加实生苗为外植体,诱导愈伤组织,通过间接发生途径诱导刺五加体细胞胚胎,获得再生植株,成功移栽；对体细胞胚胎进行同步化调控、细胞学观察并对体胚发生过程中可溶性糖及蛋白质的变化情况进行研究。主要研究结果如下：1.刺五加诱导愈伤组织的最适外植体为叶片,诱导率为93.5%。2.附加1.5mg·L-12.4-D的基本培养有利胚性愈伤产生,诱导率最高为66.7%；在水分和营养物质缺乏的情况下,连续培养70d,外植体能够直接形成胚性愈伤组织,诱导率为53.3%；在1000Lx为诱导胚性愈伤组织的最适光照条件。3.在本实验体系中2,4-D在胚性愈伤诱导阶段起促进作用,在体细胞胚胎发生、发育阶段则起抑制作用；悬浮培养虽然有利于刺五加体细胞胚胎的诱导,但不利于心形胚向子叶形胚的过度；葡萄糖2%和蔗糖2%混合使用时体胚的诱导效果较好,诱导率为58%。4.通过体胚发生途径获得的再生苗,体胚萌发率为93%,移栽成活率为86%。5.本实验通过细胞学观察发现刺五加体细胞胚胎为愈伤组织内部发生,单细胞起源。依次经过早期幼小原胚、球形胚、心形胚、鱼雷形胚、子叶形胚、成熟胚最终发育成完整植株。6.利用悬浮培养结合过筛法使初始细胞群体基本均一,进而使体细胞胚胎发生同步进行,这能有效控制球形胚和成熟胚的同步化,同步化率分别为100%、95%,而鱼雷形胚和子叶形胚的最好同步化效果分别为57%和47%；心形胚的同步化效果最差。低温处理2d,鱼雷形胚的数量明显高于其他时期体胚数,同步化率达到39.34%,同步化效果明显。本实验还采用DNA抑制剂(5-氟脱氧尿苷)法使心形胚的同步化率达到了30.52%。5-氟脱氧尿苷调控刺五加胚性细胞有丝分裂同步化的最适浓度为1.5μg·L-1。7.以添加50g/L蔗糖的MS培养基中的成熟胚萌发的同步化率最高,同步化率为99.7%。8.肌醇缺失培养基中的培养物生长状态良好,成熟胚的萌发同步化率为95.7%比标准MS培养基的同步化率高。9.可溶性蛋白的含量在刺五加体胚发生途径获得再生植株的整个过程中,出现两个峰值,分别是在胚性愈伤阶段和成熟胚时期。在体胚发育过程中,可溶性糖的含量在胚性愈伤组织阶段最高,伴随着体胚的发育逐渐下降。