抗生素是临床上应用最多和最频繁的药物之一,帮助治愈了许多由病原微生物引起的感染性疾病。但是随着抗生素的滥用也出现了一系列严重的副作用,人们发现致病菌能够进化出耐药性并在抗生素造成的生存压力下活下来,随着时间的推移,致病菌的耐药性剂量将会扩大到更高的浓度。因此,迫切需要探索有效预防和治疗的新策略。益生菌是指在摄入一定剂量后对宿主健康起促进作用的活的微生物,它通过黏附定殖于宿主并与宿主共生,能够在细胞间或细胞与宿主之前进行信息交换、能量消耗、储存和重新分配等关键的化学转化,参与调节机体的新陈代谢,增强免疫系统功能,改善健康水平。在过去的几十年里,益生菌调理主要针对肠道细菌介导的感染,目前治疗范围已扩大到肠道以外,可以用于预防和治疗泌尿生殖系统感染、皮肤感染和呼吸道感染等。益生菌的使用有助于建立有益微生物菌群,从而阻碍致病微生物的生长和定殖,是对抗病原微生物最具潜力的抗生素替代品。近年来人们对于益生菌防治口腔致病菌感染的兴趣越来越广泛,但是对其机理并不是很明了。本文从传统发酵食品中分离并筛选出具有抗口腔致病菌作用的乳酸菌,通过体外实验评价其益生特性,并对乳酸菌抑制口腔致病菌生物膜的形成、结构和活性等机理进行了研究。具体研究内容与结果如下:1.腌制菜中抑制口腔致病菌的乳酸菌的分离、筛选和鉴定。本文从传统发酵食品腌制菜中共分离出菌株126株,采用牛津杯打孔法抑菌实验筛选出对口腔致病菌变异链球菌、白色念珠菌、牙龈卟啉单胞菌有抑制作用的10株乳酸菌。通过对菌株进行菌落形态学观察和生理生化特征的检测,同时结合16S r DNA分析对菌株种属进行鉴定。这为进一步开展乳酸菌对口腔致病菌的抑制作用机制研究奠定了可靠的实验基础。2.戊糖片球菌AC1-2和弯曲乳杆菌BSF206对变异链球菌生物膜形成的抑制作用。通过体外实验对抗变异链球菌乳酸菌的耐受性、表面特性（自聚集性、共聚集性、疏水性和粘附性）、安全性进行评价,戊糖片球菌AC1-2和弯曲乳杆菌BSF206具有良好的耐受性,保证两株乳酸菌在极端环境中具有较高的存活率。两株乳酸菌表面都具有较强的疏水作用力和静电作用力,并对牙龈上皮细胞有一定的黏附能力,提高菌株的黏附和定殖。利用显微镜和扫描电镜观察弯曲乳杆菌BSF206和戊糖片球菌AC1-2对变异链球菌生物膜形成和结构的抑制作用,检测变异链球菌中致龋毒力因子基因的表达水平,对弯曲乳杆菌BSF206和戊糖片球菌AC1-2抑制变异链球菌的机制进行探讨。戊糖片球菌AC1-2和弯曲乳杆菌BSF206能够抑制变异链球菌中致龋相关毒力因子基因gtf A、gtf B、ftf、vic R等的表达水平,降低水不溶性胞外多糖的分泌量,从而有效抑制变异链球菌生物膜结构的形成。3.魏斯氏菌MSH105对白色念珠菌的抑制作用。通过体外实验对抗白色念珠菌乳酸菌的耐受性、表面特性（自聚集性、共聚集性、疏水性和粘附性）、安全性进行评价,魏斯氏菌MSH105具有良好的耐受性,保证其在口腔极端环境的生存优势。同时魏斯氏菌MSH105具有较强的疏水作用和静电作用,并对HT-29和牙龈上皮细胞有一定的黏附能力,促进菌株的粘附和定殖。魏斯氏菌MSH105对红霉素、米诺环素表现敏感,具有良好的安全性。利用光学显微镜和荧光显微镜观察魏斯氏菌MSH105对白色念珠菌生物膜的形成和活性的抑制作用,并采用试剂盒检测了白色念珠菌生细胞膜的完整性、活性氧积累水平、线粒体膜电位,对魏斯氏菌MSH105抑制白色念珠菌的机制进行探讨。魏斯氏菌MSH105能够通过增强白色念珠菌中活性氧的积累量,引起线粒体膜电位的去极化,增强菌体细胞膜的通透性,促进细胞的凋亡,从而抑制白色念珠菌增殖和生物膜的形成。4.肠膜明串珠菌LVBH107对牙龈卟啉单胞菌的抗菌作用及体外抗炎作用。通过体外实验对抗牙龈卟啉单胞菌乳酸菌的耐受性、表面特性（自聚集性、共聚集性、疏水性和粘附性）、安全性进行评价,肠膜明串珠菌LVBH107具有良好的生存优势,同时具有自聚集、共聚集、粘附能力,有助于菌株的粘附和定殖。肠膜明串珠菌LVBH107对红霉素、强力霉素和米诺环素等敏感,是安全、可控的益生菌。采用光学显微镜和荧光显微镜观察肠膜明串珠菌LVBH107对牙龈卟啉单胞菌生物膜形成和活性的影响,并建立巨噬细胞炎症模型,分析肠膜明串珠菌LVBH107的抗炎作用。肠膜明串珠菌LVBH107能抑制牙龈卟啉单胞菌生物膜的形成,并抑制生物膜中细菌的活性。肠膜明串珠菌LVBH107能减轻牙龈卟啉单胞菌脂多糖介导的炎症反应,不同程度地减少促炎因子和炎症介质的分泌,同时抑制炎症相关因子m RNA的表达水平,显示出抗炎潜能。综上,本研究从腌制菜中分离并筛选出对口腔致病菌具有抑制作用的乳酸菌,综合评价了其耐受性、表面特性和安全性,并探讨了乳酸菌抑制致病菌的作用机制。这为乳酸菌作为抗菌生物材料的开发提供了新方向,也为益生菌新功能的应用开拓了新领域。