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研究背景心血管病是造成人类死亡的重要的疾病之一,其中心肌梗死和慢性心功能不全而导致死亡占心血管病死亡50%以上,目前所用的治疗手段如溶栓、植入支架等介入手段只是恢复血流的再灌注,防止心梗面积的扩大,而不能逆转已坏死的心肌。心脏移植手术由于供体来源,免疫排斥以及高额的手术费用而难以在临床上广泛使用。自20世纪90年代以来,干细胞技术的出现与发展,给予治疗这类疾病以突破性的发展,随后动物实验证实,胚胎干细胞,骨骼肌干细胞,骨髓干细胞等可以作为细胞移植的干细胞,但是存在供体来源受限,免疫排斥及伦理学纠纷问题等缺点,这使国内外的许多学者陷入困境,就在这时一种新的干细胞-脐血干细胞应运而生了,与其他干细胞相比脐血干细胞具有以下优越性:脐血干细胞取材方便、含量丰富、排斥反应性小,对产妇及新生婴儿无危害等优点而受到广泛关注,理论上成为最适宜的干细胞来源。研究表明脐血干细胞移植可减低心梗范围和改善心功能等,但脐血干细胞静脉移植对心肌细胞凋亡的影响国内尚未有报道。本研究旨在观察人脐血单个核细胞静脉移植对家兔心肌梗死后心功能及心肌细胞凋亡的影响。目的探讨人脐血单个核细胞静脉移植对家兔心肌梗死后心功能及心肌细胞凋亡的影响。方法45只健康成年中国家兔(雌雄不限,体重2.5-3.0Kg)随机分为3组:(1)移植组:15只,AMI模型建立后24小时经耳缘静脉注入含3×10~6 BrdU标记HUCBC细胞悬液500uL。(2):对照组:15只,AMI模型建立后24小时经耳缘静脉注入生理盐水500uL。(3)假手术组:15只,左前降支穿线不结扎,术后24小时经耳缘静脉注入生理盐水500uL。移植后1周、2周、4周各组随机选取5只家兔行超声检测心功能;心肌组织切片HE染色观测心肌病理变化;脱氧核糖核酸末端转移酶介导末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡;免疫组化法检测心肌BrdU阳性细胞及Bcl-2、Bax蛋白在心肌细胞中表达水平。结果(1)与假手术组比较,移植组与对照组超声心功能指标短轴缩短率(LVFS)、左室射血分数(LVEF)均显著下降;与对照组比较,移植组移植后1周、2周、4周LVFS,LVEF均明显改善(P＜0.01)(2)移植组与对照组HE染色显示梗死区明显变薄,并有大量纤维结缔组织形成。移植组免疫组化显示梗死周边区存在BrdU阳性细胞;部分染色阳性的细胞形态呈扁平状,参与血管壁的组成。对照组梗死区及其周边均未检测到BrdU阳性的移植细胞。(3)免疫组化显示对照组、移植组Bcl-2及Bax蛋白均有明显阳性表达;与对照组相比,移植组Bcl-2蛋白水平显著升高(P＜0.05),Bax蛋白水平显著降低(P＜0.05)而假手术组基本无Bcl-2,Bax阳性表达。(4)TUNEL法结果显示移植术后4周移植组心肌细胞凋亡计数显著低于对照组(P＜0.05)。结论(1)经静脉移植人脐血细胞治疗家兔急性心肌梗死能显著改善心功能;(2)经静脉移植人脐血细胞治疗家兔急性心肌梗死,脐血细胞能迁移至梗死周边区,并存活;(3)经静脉移植人脐血干细胞治疗家兔可调节急性心肌梗死后心肌细胞Bcl-2及Bax蛋白表达,减少梗死区域的心肌细胞凋亡。