bFGF影响体外培养的不同分化阶段成骨细胞活性及凋亡的实验研究

来源 :昆明医学院 昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:alicial
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目的:探讨bFGF(basic fibroblast growth factor,bFGF)调节成骨细胞活性和凋亡与细胞分化的关系。材料与方法:用组织块培养方法作SD大鼠胎鼠骨源性成骨细胞的体外培养,获取实验细胞模型并划分其分化阶段。在成骨细胞不同分化阶段加入10μg/L的bFGF培养3天后,利用生物化学技术、放射免疫技术检测不同分化阶段成骨细胞活性及bFGF对成骨细胞活性的影响;并用流式细胞仪检测法(flow cytometer,FCM)检测DNA含量及Bcl-2、Fas的表达,分析bFGF对不同分化阶段成骨细胞凋亡及其相关基因Bcl-2、Fas的影响。未加bFGF者为对照组。结果:取SD大鼠胎鼠颅骨利用组织培养方法分离培养出的细胞,经形态学和ALP(alkaline phosphatas,ALP)、OC(osteocalcin,OC)测定,鉴定为高纯度成骨细胞,且具有分化的阶段性。bFGF组中ALP含量较对照组低,OC含量与对照组相比有增加趋势。流式细胞仪检测到bFGF组中各分化时期组成骨细胞凋亡率均较相对应的对照组低,Bcl-2的表达均较对照组高,Fas抗原的表达显著低于对照组。结论:bFGF(10μg/L)抑制分化中成骨细胞ALP活性,对OC增加影响不明显;bFGF对分化中成骨细胞凋亡有抑制作用,其机理与调节Bcl-2和Fas的表达有关。
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