癌性恶液质是一种进行性的消耗综合征，表现为厌食，碳水化合物、脂肪及蛋白质代谢异常，进行性的脂肪和肌肉组织的分解，器官功能活性下降，最终导致全身哀竭，严重影响病人的生活质量，是癌症病人死亡的一个重要因素。目前对恶液质的发病机制还没有完全阐明，为了改善癌症病人的预后，因此对癌性恶液质发病的分子生物学机制有必要进行深入研究。 癌性恶液质是由于肿瘤与宿主相互作用产生的促炎细胞冈子以及肿瘤的代谢产物所导敛的代谢紊乱所致。研究表明多种炎症细胞因子参与癌性恶液质的发生，如TNF—α、IL—6、IL-1以及IFN—γ等，这些细胞因予能够导敛体重下降、急性相反应、脂肪及肌肉组织降解，以及能量消耗增加，且炎性反应的强弱和生存期及预后呈负相关，而利用细胞因子拮抗剂或抑制细胞因子合成能够逆转恶液质体重丢失及组织降解。我们在前期的动物及临床研究中也证实：癌性恶液质的发生与细胞因子的产生密切相关，血清细胞因子水平和炎性反应的程度以及组织的降解呈正相关，调控细胞因子的合成可以改善恶液质。 NF—κB是细胞内重要的转录因子，参与机体对免疫应答和炎症反应密切相关的靶基因的转录调控，细胞因子IL-1、IL—6、IL—8、TNF—α等、急性相反应蛋白等受其调控。正常情况下NF—κB与其抑制子IκBα结合以无活性的形式存在于细胞浆中，当受到各种刺激信号作用时，IκBα被磷酸化后经泛素—蛋白酶体途径降解而和NF—κB解离，从而使NF—κB激活并转入细胞核内诱导相关基因的表达。因NF—κB对诸多炎症介质的广泛调节作用，使其在炎性反应中具有重要的防治价值。研究表明癌性恶液质中肿瘤和免疫系统中　NF—κB活性显著增强，抑制NF—κB的活性可以抑制肿瘤生长、促进肿瘤凋亡，抑制炎性细胞因子的合成而改善恶液质。已有动物实验证实通过瘤内注射寡核苷酸肽和NF—κB结合位点结合抑制NF—κB的激活，能够抑制IL—6的表达从而改善恶液质。我们在前期的研究中也证实：应用吲哚美辛可以抑制荷瘤鼠炎性细胞因子TNF—α、IL—6的合成，抑制肌肉蛋白降解，改善恶液质，其机制与抑制NF—κB途径的激活相关。这些结果说明NF—κB途径的激活在癌性恶液质炎性反应中起重要作用，因此本研究即在前面研究的基础上应用特异性的NF—κB抑制剂探讨NF—κB途径在癌性炎性反 应中的作用以及对恶液质治疗的价值。然而目前尚没有直接应用于临床的NF—κB抑制剂，因此尚不能直接通过应用NF—κB抑制剂来进行临床抗恶液质治疗。 由于NF—κB的激活依赖泛素—蛋白酶体途径，其激活过程中有两步需要泛素—蛋白酶体途径的参与：NF—κB亚基P50由其前体P105转化而来需要蛋白酶体降解；IκBα需要经泛素—蛋白酶体途径降解从而与NF—κB解离使NF—κB激活。因此基于泛素—蛋白酶体途径对NF—κB途径激活的作用，使其必然能够在抗炎治疗中起到重要作用。研究表明通过抑制泛素—蛋白酶体途径活性来调控NF—κB激活在感染、免疫排斥等炎性疾病中能够起到显著的抗炎作用。此外该途径在癌性恶液质的蛋白降解中亦起着重要的作用，我们前期的研究证实抑制肌肉蛋白酶体活性可以抑制肌肉蛋白的降解，改善恶液质。然而调控泛素—蛋白酶体途径的活性能否在癌性炎性反应中起到抗炎作用，目前尚未见研究报道。由于目前已有蛋白酶体抑制剂如Bortezomib应用于临床的抗肿瘤治疗，且其调控的主要途径是通过抑制肿瘤NF—κB的活件达到治疗目的，因此本研究的另一个目的即通过利用蛋白酶体抑制剂Bortezomib来抑制C26荷瘤鼠肿瘤组织泛素—蛋白酶体途径的激活，来探讨调控泛素—蛋白酶体途径在治疗痛性炎性反应中的可行性，为未来的临床治疗提供一定的理论依据。 第一部分NF—κB抑制剂PDTC调控癌性恶液质的实验研究 目的：评价NF—κB 抑制剂毗咯烷二硫代氨皋甲酸盐(pyrrolidinedithiocarbamate，PDTC)对C26恶液质小鼠NF—κB途径的激活以及对炎症细胞因子IL—6的合成及恶液质的调控作用。 方法：采川雄性BALB/c小鼠皮下接种鼠C26结肠癌细胞诱导恶液质模型，每日监测小鼠食物摄入量、体重及肿瘤体积，于肿瘤接种后第7天开始每日给予荷瘤鼠腹腔注射生理盐水及不同剂量的PDTC(10、50及100 mg/kg)，第16天处死小鼠，检测血清生化指标、血清IL—6、IL-10及肿瘤组织IL—6水平，肿瘤组织NF—κB活性。 结果：荷瘤对照组出现显著的组织降解，第16天其去瘤体重为正常小鼠的71.3％(P＜0.01)，腓肠肌及附睾脂肪重量分别减少42.4％和70.4％(P＜0.01)，血清白蛋白、葡萄糖及甘油三酯水平显著下降(P＜0.01)，血清IL—6和IL-10及肿瘤组织IL—6水平显著升高(P＜0．01)。PDTC剂量依赖性地抑制肿瘤组织NF—κB激活， 抑制肿瘤组织IL-6的合成，抑制了去瘤体重下降、腓肠肌及附睾脂肪的分解，改善了恶液质。PDTC 100mg/kg显著抑制肿瘤生长(P＜0.05)。各组间食物摄入量无明显统计学差异(P＞0.05)。 结论：NF-κB途径的激活在癌性炎性反应中起重要作用，PDTC能有效地改善恶液质，其机制是通过抑制肿瘤组织NF-κB的激活，抑制炎症细胞因子的合成，从而改善恶液质。 第二部分　调控泛素-蛋白酶体途径治疗癌性炎性反应的实验研究 目的：应用蛋白酶体抑制剂Bortezomib 调控蚩白酶体活性对NF-κB途径激活及细胞因子合成的影响，探讨其对癌性炎性反应及恶液质的治疗价值。 方法：利用小鼠C26结肠癌细胞诱导恶液质模型，40只雄性BALB/c小鼠随机分为5组：健康组、恶液质+生理盐水组以及三种剂量的Bortezomib(0.1、0.5及1.0 mg/kg)治疗组。每日监测小鼠体重、食物摄入量及肿瘤体积，于肿瘤接种后第6、9、12和15天每日给予荷瘤鼠腹腔注射牛理盐水及不同剂量的Bortezomib，第16天处死小鼠，检测肿瘤组织NF-κB活性、肿瘤组织IL-6以及血清IL-6、IL-10水平，血清生化指标、肿瘤及肝组织病理学检查。 结果：第16天时生理盐水组出现显著的体重及去瘤体重的下降(P＜0.01)、腓肠肌萎缩及附睾脂肪的降解(P＜0.01)，同时血清IL-6、IL-10及肿瘤组织IL-6水平显著升高(P＜0.01)。Bortezomib不同程度地抑制了去瘤体重、腓肠肌及附睾脂肪的降解。Bortezomib剂量依赖性地抑制了肿瘤组织NF-κB的激活及IL-6的合成，以1.0 mg/kg最显著。0.5 mg/kg显著抑制了血清IL-6水平的升高(P＜0.01)、IL-6/IL-10水平显著降低(P＜0.05)，同时显著改善了去瘤体重的下降、抑制了腓肠肌及附睾脂肪的分解(P＜0.01)。但1.0mg组血清IL-6水平反而显著升高，与组织IL-6水平变化趋势不一致，且具有明显的胃肠道副反应及肝毒性。Bortezomib具有明显的抗肿瘤活性，其中0.5及1.0 mg/kg明显抑制肿瘤牛长(P＜0.01)。 结论：调控泛素-蛋白酶体途径能够抑制NF-κB激活及细胞冈子IL-6的转录，减轻炎性反应，从而抑制组织成分降解，改善恶液质；同时能直接抑制肌肉中泛素-蛋白酶体途径而直接抑制肌肉蛋白的分解：且蛋白酶体抑制剂具有显著的抗肿瘤效应。 总结 促炎细胞因子在癌性恶液质发生中起重要作用，NF—kB途径的激活与癌性炎性反应的发生相关，调控NF—kB途径可以抑制细胞因子的合成，减轻炎症反应，改善营养状况，逆转恶液质。调控泛素—蛋白酶体途径能够抑制NF—kB激活、抑制炎性细胞因子的转录、减轻炎性反应、抑制组织降解、改善恶液质，同时蛋白酶体抑制剂能直接抑制肌肉泛素—蛋白酶体途径而抑制肌肉蛋白的分解，且同时蛋白酶体抑制剂具有显著的抗肿瘤效应。