茯苓酸性多糖的分级分离、结构分析及其生物活性研究

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茯苓为多孔菌科真菌茯苓(Poria cocos(Schw.)Wolf)的干燥菌核,收载于历年版《中国药典》,具有渗湿利尿、和胃健脾、宁心安神之功效,广泛用于临床治疗和养生保健。国内外学者研究表明茯苓多糖具有抗肿瘤、调节免疫等活性,羧甲基茯苓多糖和茯苓水溶性多糖的抗氧化、抗肿瘤活性和结构表征已有文献报道。但茯苓酸性多糖的体外抗氧化、抗肿瘤活性和结构表征尚未见文献报道。而实验室前期研究发现茯苓酸性多糖是具有调节免疫和抗肿瘤作用的。本论文对茯苓酸性多糖的分级分离,体外抗氧化、抗肿瘤活性及其结构表征进行了初步研究。采用水和1mol/LNaOH溶液分别提取茯苓水溶性多糖(PWP)及总酸性多糖(PAP);另取茯苓经水提取后的药渣,依次用0.1-1.0mol/L梯度NaOH溶液提取分离得到10种茯苓分级酸性多糖组分(PSAP1-PSAP10)。茯苓酸性多糖水解后制备乙酰化衍生物,采用GC-MS分析方法,测定茯苓酸性多糖的单糖组成;通过凝胶色谱柱的分析方法,测定茯苓酸性多糖的分子量;研究结果表明10个级别的茯苓酸性多糖的单糖组成主要为葡萄糖,分子量分布在3万到13万之间。以多糖还原能力、DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率等为检测指标,比较PWP、PAP和PSAP1→PSAP10十种分级组分的抗氧化活性。研究结果表明, PWP和PAP具有明显抗氧化作用;PSAP1→PSAP10分级酸性多糖组分均具有不同程度的抗氧化作用,其中PSAP8和PSAP9抗氧化作用优于其他组分。对10种分级酸性多糖的抗肿瘤活性研究结果显示其均有一定程度的抗肿瘤活性,其中0.9M、1.0M/LNaoH提取的分级酸性多糖抗肿瘤活性最强。综合分析,茯苓多糖具有良好的生物活性,其酸性多糖的生物活性与其酸性强弱和分子量大小相关。本论文首次对茯苓酸性多糖和不同酸度分级酸性多糖的生物活性及其初级结构进行了比较研究,从而进一步诠释了茯苓的药效物质基础,并为探讨茯苓酸性多糖的构效关系提供了参考依据。
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