绿粘帚霉（Gliocladium virens）对多种病原菌都具有拮抗活性，是一种潜力巨大的生防菌，在林木病虫害的生物防治中起着重要作用。国内有关绿粘帚霉产几丁质酶及其生防特性的研究较少，大多为对绿粘帚霉的重寄生、竞争作用以及抗菌代谢产物胶霉毒素的研究。就此，本研究以绿粘帚霉F051菌株为对象，研究绿粘帚霉F051产几丁质酶的最佳碳、氮源以及最优培养条件；分离纯化几丁质酶并对几丁质酶学性质及其对三种病原真菌交链孢、镰刀菌和立枯丝核菌菌丝细胞壁的降解作用进行研究。研究结果如下：还原糖法测定，绿粘帚霉F051发酵上清液与胶态几丁质混合，再与DNS反应后，产生棕红色物质，说明有几丁质酶的存在，即绿粘帚霉F051可产生几丁质酶。绿粘帚霉F051只有在含有几丁质诱导物的培养基中发酵才能产生几丁质酶，说明绿粘帚霉F051产生的几丁质酶是一种诱导酶。在葡萄糖，蔗糖，麦芽糖，乳糖四种碳源，（NH₄）₂SO₄，NH₄NO₃，蛋白胨，酵母粉四种氮源中，经测定，麦芽糖和酵母粉分别为碳源和氮源时，绿粘帚霉所产几丁质酶活最大，即麦芽糖和酵母粉为产几丁质酶的最佳碳、氮源。绿粘帚霉F051产几丁质酶的条件优化，通过正交试验测定了温度、pH值、瓶装量、接种量、碳源和氮源的量对产酶的影响。研究表明碳源的量对绿粘帚霉F051产几丁质酶的影响最大，其次是温度，再次是瓶装量；当温度为28℃，pH值等于7，100mL的瓶装量，接种1mL孢悬液且碳源和氮源的量分别为1.5％和0.2％时几丁质酶活力最大，为产酶的最佳条件。通过60％硫酸铵沉淀分离，再经High Q阳离子交换柱层析纯化几丁质酶，经SDS—PAGE测定，该几丁质酶分子量约为40KD。对几丁质酶酶学性质的研究表明，在20～80℃范围内，几丁质酶的最适反应温度为50℃，随后温度升高几丁质酶活迅速下降；该酶在20～40℃水浴中保温1h后，酶活基本稳定，超过这个温度酶活逐渐下降，80℃保温1h酶活完全丧失。当pH=4时酶活最大；在pH2～8的不同缓冲液中预处理1h，几丁质酶在pH3～8范围内基本保持稳定。金属离子中Ba²⁺、Mn²⁺、Sn²⁺对几丁质酶有激活作用Sn²⁺作用最强；Na⁺、K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、Fe²⁺对几丁质酶有抑制作用，Fe²⁺完全抑制几丁质酶活。不同浓度的有机溶剂处理几丁质酶，5％和20％的丙酮，5％的乙二醇和正丙醇对几丁质酶有激活作用，其余有机溶剂均对该酶有抑制作用。几丁质粗酶对三种病原真菌菌丝细胞壁的降解作用显示，几丁质酶可使交链孢和镰刀菌菌丝细胞壁变薄、溶解、质壁分离、原生质膨大；丝核菌原生质体分布不均匀、空泡化、细胞壁变薄并出现断裂现象。试验中未发现几丁质粗酶对交链孢和镰刀菌孢子生长有影响。