溶藻菌的溶藻物质分离与初步鉴定

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面对当前严重的湖泊富营养化情况,研究者们开发了各种方法来控制、解决藻类水华的发生。但是相对于物理、化学的方法的控藻的效果,生物控藻的方法是最有前景的。本实验室中通过喷雾干燥技术将放线菌AN02的发酵上清液制备成一种溶藻粉剂。这种粉剂在云南滇池的现场小范围的试验中有着明显的溶藻效果。本实验过程中,通过对粉剂的初步处理后进行液相色谱试验,旨在分离及鉴定出粉剂中的溶藻活性物质。通过对液相条件进行优化,最终确定了液相条件:检测波长为198nm,色谱柱为AgilentXDB-C18,5um,4.6x250mm;水:甲醇=85:15(V/V),流速为0.4mL/min。通过定时的收集馏分的方式,最终确定了7-8min的馏分有明显的活性。从7-8min馏分中收集到一单峰,分子量为645.2。在用粉剂处理DS藻的过程中,发现藻出现沉淀、黄化死亡现象。将乙醇处理后的粉剂上清,在溶藻活性较高的粉剂上清投加比例条件下(1:50,1:100,1:200)加到DS藻中后,第1天到第3天藻细胞沉降明显,说明从第1天到第3天是藻发生沉淀的关键时间段。在有明显溶藻活性的粉剂上清投加比例前提下,发现从第11天开始,沉淀中的藻细胞数量明显减少,说明投加乙醇处理后AN02粉剂上清液后的第11天可能是沉淀中的藻细胞走向破坏死亡的一个关键时间点。
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