五步蛇（Deinagkistrodon acutus）为我国十大剧毒蛇之一,毒素进入伤者体内后会出现水肿、疼痛、组织感染、坏死等多种症状。目前,国内外蛇伤多发地区在亚洲、非洲和南美洲等,常用草药急救蛇伤患者。虎耳草（Saxifraga stolonifera Meerb.）作为我国传统的民族药物,在民间常用其治疗蛇伤,且效果明显。因此本文采用苗药虎耳草对五步蛇毒活性及作用机制进行探究,研究结果如下:（1）虎耳草水提物的响应面优化提取工艺及总酚（TP）含量与抑制五步蛇毒磷脂酶（PLA2）活性的相关性。结果表明响应面法优化提取虎耳草水提物的最佳工艺条件为:粒径60目,料液比1:50,超声功率250 W,超声时间1.8 h,在此优化工艺条件下虎耳草TP含量（以每克干样品中酚酸类化合物相当于没食子酸（GA）的质量表示）为（8.69±0.046）g GA/100 g,PLA2活性抑制率（PIR）为（40.91±0.21）%;两者的相关性分析表明,虎耳草TP含量与PIR的实验结果具有相关性（P<0.01）,推测TP是虎耳草抑制五步蛇毒的物质基础。（2）虎耳草水提物对五步蛇毒中主要酶的体外活性抑制研究。首先,选取五步蛇毒PLA2酶、蛋白水解酶和透明质酸酶进行体外实验,利用琼脂糖平板法进行抑制PLA2酶和蛋白水解酶活性实验,随着虎耳草水提物浓度的增加,抑制活性逐渐增大,虎耳草水提物对五步蛇毒PLA2酶和蛋白水解酶的抑制活性的EC50值分别为0.115 mg/mL和0.026 mg/mL,EC50值越小,抑制效果越好。利用紫外分光光度法进行抑制透明质酸酶活性实验,结果表明,抑制活性随着虎耳草水提物浓度的增加而增强,虎耳草水提物抑制五步蛇毒透明质酸酶活性的EC50值为0.238 mg/mL。再以季德胜蛇药片作为阳性对照实验,探究虎耳草水提物与季德胜蛇药片两者在同一浓度时对五步蛇毒PLA2酶、蛋白水解酶和透明质酸酶活性的抑制作用。实验结果表明,虎耳草水提物和季德胜蛇药片对五步蛇毒PLA2酶活性的抑制率分别为（41.2±0.27）%和（41.7±0.2）%;虎耳草水提物和季德胜蛇药片对五步蛇毒蛋白水解酶活性的抑制率分别为（29.4±0.17）%和（31.8±0.15）%,虎耳草水提物和季德胜蛇药片对五步蛇毒透明质酸活性的抑制率分别为（42.1±0.17）%和（40±0.25）%,根据显著差异分析可得,虎耳草水提物和季德胜蛇药片对五步蛇毒PLA2酶、蛋白水解酶和透明质酸活性的抑制率均无显著差异,说明虎耳草水提物与季德胜蛇药片抗五步蛇毒的效果接近。（3）虎耳草水提物对五步蛇毒引起的体内活性抑制研究。选取五步蛇毒引起的出血活性实验和水肿活性实验进行体内实验设计,利用腹腔注射进行抑制小鼠出血活性实验,注射3 h后处死,解剖后可发现注射部位皮肤产生血晕圈,测量可知,随着虎耳草水提物浓度增大,血晕圈的直径逐渐减小,当五步蛇毒与虎耳草水提物质量比为1:500时,抑制小鼠出血活性的效果最好,抑制率为（64.2±0.17）%;以注射小鼠右后足的方法进行抑制小鼠水肿活性实验,经过0、1、2、3 h后,测量右后足水肿程度,实验结果表明,随着虎耳草水提物浓度增大,抑制效果增强;随着时间增加,抑制效果下降,当五步蛇毒与虎耳草水提物质量比为1:500时,注射1 h后抑制效果最明显,抑制率为（63.5±0.22）%,因此五步蛇咬伤应尽早治疗效果更好。综上所述,本文确定了虎耳草水提物的响应面优化提取工艺及总酚（TP）含量与抑制五步蛇毒磷脂酶（PLA2）活性的相关性,揭示出虎耳草TP为抑制五步蛇毒活性的物质基础,通过体外和体内抑制活性实验表明虎耳草水提物对五步蛇毒活性具有抑制作用,初步探索了虎耳草抑制五步蛇毒的作用机制,为进一步开发和研究抗五步蛇毒药物增加理论依据。