牛至精油及其残渣提取物联合抑菌作用研究

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近年来,随着人们安全意识的不断提高,对天然抑菌物质的开发利用逐渐重视。我国传统药用植物提取物大多具有抑菌功效,而不同提取物的联合抗菌可以有效增强抑菌活性,拓宽抗菌谱,避免细菌耐药性的产生。牛至(Origanum vulgare L.)为唇形科(Labiatae)牛至属(Origanum L.)植物,其精油具有高效、绿色、无配伍禁忌等多种优点,被称为天然“绿色抗生素”。除牛至精油外,在提取精油后的残渣中仍富含黄酮和酚类等抑菌有效成分,对其回收利用有利于节约资源。因此,本研究首先使用水蒸气蒸馏法获得牛至精油(O.vulgare L.essential oil,OVEO),将提取精油后的固体残渣采用75%的乙醇回流提取获得残渣提取物(O.vulgare L.residue extract,OVRE),研究牛至精油和残渣提取物对肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、乙型副伤寒沙门氏杆菌和肠炎沙门氏杆菌的联合抑菌作用,为牛至资源在抑菌领域的开发利用奠定理论基础。主要研究内容和结果如下:(1)本研究获得的牛至精油和残渣提取物提取率分别为0.1%和4.9%。残渣提取物中总酚含量为121.9 mg/g,总黄酮含量为70.6 mg/g。牛至精油对金黄色葡萄球菌的MIC为0.6 mg/m L,对其余4种测试菌的MIC为1.2 mg/m L。牛至残渣提取物对金黄色葡萄球菌的MIC为2 mg/m L,对其余4种测试菌的MIC为4 mg/m L。(2)牛至精油和残渣提取物联合对5种测试菌表现出部分协同或相加效应。当精油和残渣提取物分别以0.3 mg/m L和0.5 mg/m L组合时为二者联合对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC联合),以0.6 mg/m L和2 mg/m L组合时为二者联合对其余4种测试菌的MIC联合。(3)5种测试菌经MIC联合和2MIC联合处理后,细胞形态结构遭到破坏,细胞表面疏水率,胞外碱性磷酸酶、钾离子、核酸和蛋白质含量与对照组相比,显著增加(p<0.05),表明牛至精油和残渣提取物联合可破坏细菌的细胞膜和细胞壁结构。同时,牛至精油和残渣提取物的联合还能有效抑制5种测试菌生物膜的形成,并对已形成的细菌生物膜具有一定清除作用。
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