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狂犬病病毒(Rabies virus, RV)属于弹状病毒科狂犬病病毒属,是一种高度嗜神经性、高致死性疾病,一旦表现出临床症状,死亡率高达100%。目前狂犬病的致病机理尚未完全清楚,也无有效的治疗方法,只能通过疫苗来预防。细胞凋亡是细胞中广泛存在的一种正常生理进程,不同于细胞死亡,是由基因控制的细胞主动性死亡,与细胞增殖、细胞分化关系密切,还能调控机体清除突变细胞及肿瘤细胞,并在抗病毒防御中发挥重要作用。病毒感染引起细胞凋亡,一方面细胞通过诱导凋亡有效地阻止病毒繁殖,另一方面大量的细胞凋亡会使机体致死。研究不同狂犬病病毒引起细胞凋亡情况,将会对了解狂犬病的致病机理起到辅助作用。本实验选用本实验室用RC-HL株的感染性cDNA克隆拯救的狂犬病病毒弱毒株rRC-HL和分离的强毒株GX074,以及重组病毒rRC-HL△N、 rRC-HL△P、rRC-HL△M和rRC-HL△G,对NA和RAW264.7两种细胞引起细胞凋亡的进行研究。RC-HL是目前日本广泛应用于动物的一种疫苗株,GX074是本实验室自广西地区分离得到的野毒株。分别用不同的狂犬病病毒感染以上两种细胞,分别收集不同时间点的细胞样品,用DNA片段法和Annexin V-FITC法进行细胞凋亡检测。检测结果发现,rRC-HL、rRC-HL△N、 rRC-HL △ P 、 rRC-HL △ M和rRC-HL△G感染NA细胞后均能引起不同程度的细胞早期凋亡,感染RAW264.7细胞后24 h能轻度引起细胞早期凋亡。GX074感染NA和RAW264.7细胞后均不能引起细胞早期凋亡。狂犬病病毒感染NA细胞后细胞早期凋亡时间最明显为48 h,感染RAW264.7细胞后细胞早期凋亡最为明显为72 h。综上所述,在NA和RAW264.7两种不同的细胞上,弱毒rRC-HL能引起细胞凋亡,GX074不能引起细胞凋亡,重组病毒中引起细胞凋亡比较明显的为rRC-HL△M,其次为rRC-HL△G,说明狂犬病病毒基因中M和G基因与细胞凋亡有一定的相关性。NA作为狂犬病病毒的易感细胞,病毒感染后细胞凋亡程度强于RAW264.7细胞,引起细胞早期凋亡的时间也比较早,RAW264.7作为免疫细胞,对病毒具有一定的抵御机制,引起细胞早期凋亡的时间推迟。