中药生产过程质量控制是中药现代化的关键环节之一,近年来已成中药质量控制研究的热点和难点。根据药物生产质量控制理念,结合中药的特点,本文选取临床常用、疗效确切但药效物质基础不清的板蓝根为研究载体,以中药制剂过程单元操作特别是加热过程质量控制为主要着力点和切入点,在常规理化检测和化学组分分析的基础上,引入生物活性检测,探索建立基于理化—生物关联检测的中药生产过程质量控制模式和方法,以期为中药生产中原料药、半成品和成品实现全程质量控制提供技术支持。主要研究结果如下:1.板蓝根水提液不同干燥工艺样品的质量差异性分析研究:1.1基于常规理化检测的板蓝根水提液不同干燥工艺样品的质量差异性的分析:采用单因素多水平设计,制备了不同方式和条件的板蓝根水提液喷雾干燥、冷冻干燥、减压干燥、常压干燥样品共40批。并对其色泽、性状、溶化性、含水量、临界相对湿度、pH值等物理性质进行了比较。结果表明:不同干燥方式样品的物理性质存在差异,初步发现颜色可以粗略反映质量,但与活性的相关性尚待深入分析。1.2基于指标性成分和化学指纹图谱检测的板蓝根水提液不同干燥工艺样品质量差异性分析:采用HPLC方法,对板蓝根水提液不同干燥工艺样品的化学组分(苯甲酸、水杨酸、腺苷、多糖等指标性化学成分)含量和指纹图谱进行了较系统的考察,并对干燥方式与条件对板蓝根水提液中化学组分的影响进行了比较。结果表明:各类不同干燥方式过程中,需重点关注的化学组分不相一致,其中以苯甲酸和腺苷的含量变化更为明显;各种干燥方式中冻干样品含量均值最高(其中苯甲酸0.3937±0.0010%,腺苷0.1478±0.0054%)。2.板蓝根药材、半成品和颗粒剂的全程质量变化分析:2.1基于指标性成分和化学指纹图谱检测的板蓝根药材、半成品及颗粒剂的质量变化分析:对板蓝根药材、中间品、成品进行了指标成分含量测定,建立了UPLC指纹图谱并进行分析。结果表明:不同来源板蓝根药材中尿苷(RSD>20%)和腺苷(RSD>10%)含量差异较明显,但无明显规律可循;以腺苷为例,其含量从药材→浓缩干燥→成型这几个制备环节的效价递变为100%→65.85%→59.31%;而从化学指纹图谱来看,共有峰数下降了45%,主要是强极性化合物的共有色谱峰的峰数目和峰面积降低,提示在成型的制备过程中,板蓝根中的水溶性物质相对损失高于中等和弱极性物质。2.2基于抗菌生物活性和生物热动力学检测的板蓝根药材、半成品和颗粒剂的质量波动分析:以大肠杆菌为生物模型,建立了基于生物热动力学法的板蓝根药材生物活性检测方法,并与管碟法抗菌效价测定结果进行了比较。方法学研究表明:板蓝根药材在一定浓度范围内,剂量与生物热动力学参数Qt和P2m/T2m有较好的线性关系(r>0.95),精密度较好(RSD<5%)。与管碟法抗菌效价测定结果比较显示:生物热动力学参数与板蓝根抗菌效价有较好的相关关系,并且生物热活性检测具有较好的灵敏度、重现性和特征性,可用于中药过程质量控制的生物评价方法。其中,第二指数生长期最大产热功率与达峰时间的比值(P2m/T2m)、第二指数生长期放热功率P2m、总产热量Qt可用于表征其抗菌活性。其判别方程为:JY=-13038.71+5617.55X1+212.12X2+568.63X3-1228.91X12-6.83X1X2-26.98X1X3-0.79X2-87.13X2X3-87.13X322.3板蓝根药材、半成品和颗粒剂的生物活性信息递变分析:药材→浓缩干燥→成型这几个制备环节的效价递变为100%→61.48%→47.43%,提示目前板蓝根颗粒在满足纯化、成型工艺要求的过程中,药效可能损失较大,应以药效为指导,加强其制备工艺过程研究。3.基于理化—生物关联检测的中药板蓝根过程质量控制模式和方法商建:1)针对药材样品,采用综合评价:如感官评价、规定药材产地、品种、规格、采收时间,加工方式等;2)生产过程质量控制阶段,以效价关联的生物热动力学参数等评价工艺样品质量波动范围,辅以化学组分含量的监控;3)成品阶段,采用生物效价检测或相关化学指标进行质量评价。综上,本文以中药板蓝根为例,建立以生物活性检测为核心内容的、集药典常规-化学-生物检测方法为一体的质量控制研究方法,为中药生产过程质量控制提供了技术支持。最后指出,在中药生产过程质量控制中,生物评价不可或缺;中药质量生物检定尚处于探索阶段,无论是检测指标的专属性还是方法学质量,不应以化学检定的要求来苛求生物检定;中药质量生物检定任重而道不远。