背景与目的癌恶病质是由恶性肿瘤所导致的一类代谢综合征,胰腺癌患者有着极高的癌恶病质发生率。研究者们以包括胰腺癌在内的有代表性的恶性肿瘤为中心,开展了大量有关癌恶病质的研究,从多方面阐述癌恶病质的发生机制,但迄今为止尚未有完整的发病机制被发现。癌恶病质的代谢紊乱一个代谢失衡是脂肪代谢的失衡,即癌恶病质患者体内脂肪分解增快,脂肪组织被大量消耗,脂质生成受阻,脂肪酸氧化加强,导致脂肪储存降低,从而引发体重下降,极大地影响了患者的生存和预后。有多项研究证明,肿瘤细胞可以分泌数种细胞因子,这些细胞因子可以引起上述脂代谢的失衡,但是体内实验中,由于组织之间的相互作用,肿瘤组织分泌物作用在脂肪组织上的同时,脂肪组织同样可以释放脂肪因子作用在肿瘤组织上,因此,无法将肿瘤组织分泌物对脂肪组织的影响独立出来进行观察。本研究通过对BALB/c小鼠注射胰腺癌细胞条件培养基的方法建立无癌细胞的癌恶病质模型,共进行了两个子实验。实验一通过对小鼠注射来自三种胰腺癌细胞系(Panc-1、MiaPaCa-2、BxPC-3)的条件培养基研究胰腺癌细胞可溶性分泌物对小鼠脂肪代谢的影响,实验二用不同剂量的MiaPaCa-2细胞条件培养基,研究肿瘤分泌物对脂代谢的影响是否存在“量-效”关系。方法本研究中,我们首先利用无血清培养基孵育胰腺癌细胞24h后留取上清制得胰腺癌细胞条件培养基。全研究包括两个子实验,在实验一中制得足够的胰腺癌细胞(Panc-1,MiaPaCa-2,BxPC-3)条件培养基,将这3个胰腺癌细胞条件培养基及正常DMEM培养基注射入对应组别的小鼠体内,每组小鼠连续7日接受培养基的皮下注射,每日两次。监测小鼠体重及进食量变化,检测血浆中胰岛素水平、葡萄糖含量、甘油三酯含量和小鼠胰腺、肝脏的重量,检测肌糖原和肌糖原含量,并对小鼠的腹股沟脂肪垫、附睾脂肪垫予以称重并提取蛋白检测ATGL蛋白表达水平。实验二仅选取MiaPaCa-2胰腺癌细胞系,将不同剂量的MiaPaCa-2细胞条件培养基注射入对应组别小鼠体内,余处理与实验一相同。结果实验一中,注射了培养基的4组小鼠进食量及体重均在初期下降,Panc-1组下降明显,之后随着对注射的适应,所有组别逐渐回升趋于平衡。和注射正常DMEM培养基的对照组相比,注射MiaPaCa-2和BxPC-3胰腺癌细胞条件培养基的小鼠体内出现了胰岛素抵抗,血浆胰岛素水平上升,血浆葡萄糖含量也上升,肝脏肝糖原含量下降,肌肉肌糖原无明显改变。所有注射胰腺癌细胞条件培养基的组别均出现脂肪甘油三酯脂肪酶ATGL蛋白表达水平的下降,提示脂肪分解下降,另外还观察到了血浆甘油三酯含量下降,脂肪储存量增加的现象。实验二中,注射不同剂量的胰腺癌细胞条件培养基的两个组别均可观察到小鼠血浆胰岛素、葡萄糖含量升高,肝脏肝糖原下降的趋势,高剂量组均有统计学差异,证明高剂量的注射能引起更显著的胰岛素抵抗现象。另外,也可观察到注射胰腺癌细胞条件培养基的两个组别中小鼠脂代谢呈现减弱趋势,且对比起低剂量组,高剂量组的变化更大。结论以上结果表明,对小鼠注射胰腺癌细胞条件培养基,可造成其体内脂肪代谢失衡,出现胰岛素抵抗现象,脂肪储存加强,脂肪分解减弱的现象。并且不同剂量产生的效能不同,高剂量注射组中脂肪代谢失衡现象更明显,胰岛素抵抗现象更显著,脂肪分解更弱,储存更多。