炭角菌YM 311647及神秘果叶的次级代谢产物研究

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本论文的研究内容包括两部分,第一部分为炭角菌Xylaria sp.YM 311647固体发酵产物的抗菌活性成分研究;第二部分为神秘果叶化学成分的研究。具体结果如下:在前期工作中,本实验室从印楝(Azadirachta indica)内生真菌炭角菌Xylaria sp.YM 311647的液体发酵产物中获得了一系列新的具有抗真菌活性的愈创木烷型倍半萜和异海松烷型二萜,显示了菌株产新活性化合物的潜力。为了更加深入地探究该菌株次生代谢产物的多样性,获得种类更丰富的新型活性物质,本文进一步开展了菌株YM 311647在固体培养条件下发酵产物的化学成分研究。利用大米培养基对菌株YM 311647进行固体发酵和提取,最终从发酵提取物中分离鉴定了5个新化合物,被命名为xylariosides A-E(1-5)。化合物1-3为愈创木烷型倍半萜糖苷,这类化合物在微生物资源中很少报道,化合物4和5为多羟基化的甾体皂苷,其中4含有不常见的七元A环内酯结构。神秘果(Synsepalum dulcificum)为山榄科(Sapotaceae)神秘果属(Synsepalum)植物,目前主要关注于其果实在食品和医药方面的应用。文献报道神秘果的叶片具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤、降胆固醇和治疗糖尿病等作用,但并未开展过系统的有效物质研究。为此,本论文进行了神秘果叶的化学研究,目的在于发现其抗氧化和抗菌活性的有效成分。对神秘果叶的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,最终鉴定了29个化合物,其中化合物3-O-b-D-xylopyranosyl-(1→3)-b-D-glucopyranosyl protobassic acid methyl ester(6)为三萜皂苷类新化合物,(+)-isolarisiresinol-2′-O-β-D-glucopyranoside(7)为木脂素糖苷类新化合物。所分离到的化合物均为第一次从神秘果植物中获得,这些化合物的主要类型为黄酮,黄酮苷,木脂素,三萜,三萜苷,降倍半萜苷和脑苷脂。对获得的部分化合物进行抗菌和抗氧化活性检测。抗菌试验表明,来源于炭角菌YM 311647的化合物4和5展现出较强的抗真菌活性。其中4对小麦赤霉菌(Gibberella saubinetii YM 3042),新月弯孢霉(Curvularia lunata YM 3034)和炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides YM 3012)的最小抑制浓度MIC值分别为4,4和8μg/m L,其抗病原真菌活性和阳性对照制菌霉素相当。化合物5对新月弯孢霉和烟草赤星病菌(Alternaria alternata YM 3073)具有较显著的抑制活性,其MIC值都为8μg/m L。对于来源于神秘果叶的化合物,其中化合物9对小麦赤霉菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSAYM 3106)具有较强的抑制活性,其MIC值都为8μg/m L。化合物10对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium YM 3115)具有较好的抑制活性,其MIC值分别为8和16μg/m L。在DPPH自由基测定和ABTS+清除的抗氧化试验中,化合物23,24,30和31均显示出较好的抗氧化活性。在DPPH试验中,它们的IC50值分别为0.27,0.43,0.45和0.90μg/m L。在ABTS+试验中,它们的IC50值分别为4.84,3.33,6.86和6.83μg/m L。其余化合物显示中等的抗氧化活性。综上所述,本论文在对炭角菌Xylaria sp.YM 311647和神秘果叶的次级代谢产物研究中共获得7个新化合物,其中3个为微生物资源中很少被获得的愈创木烷型倍半萜糖苷,2个为甾体皂苷(包括1个含有罕见的七元A环内酯),1个三萜皂苷和1个木脂素糖苷。菌株YM 311647固体发酵物与液体发酵物相比,产生了新型抗菌活性的愈创木烷型倍半萜糖苷和甾体皂苷。生物活性试验显示,有4个化合物展现出较好的抗菌活性,4个化合物展现出较强的抗氧化活性。通过研究,利用固体发酵的方式进一步丰富了炭角菌YM 311647新结构次级代谢产物的种类和数量;探明了神秘果叶化学成分的结构类型,揭示了化合物9和10为主要的抗菌活性成分,化合物23,24,30和31为主要的抗氧化活性成分。
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