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第一部子宫内膜异位症对体外受精-胚胎移植治疗临床结果的影响目的:回顾性比较分析子宫内膜异位症(EMs)合并不孕和对照组(单纯输卵管因素性不孕)行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的临床数据,探讨EMs对于IVF-ET治疗结局的影响。方法:选取107例腹腔镜诊断EMs的不孕女性(其中58例为I、II期EMs,49例为III、IV期EMs)和121例对照组女性纳入研究,比较两组一般情况及IVF-ET治疗结局相关指标。结果:(1)EMs和对照组两组患者的年龄、不孕年数、体重指数、基础FSH值、HCG日E2水平和移植日子宫内膜厚度和移植胚胎数进行比较,差异均无统计学意义;(2)EMs组FSH使用总量显著高于对照组(P<0.05);(3)两组患者的获卵数和受精率相比无差异,但EMs组的优质胚胎率(P<0.01)和可冷冻胚胎数(P<0.05)均显著低于对照组,临床妊娠率和种植率在EMs组有下降趋势但差异无统计学意义。结论:EMs对于IVF-ET治疗的临床结果具有不良影响。EMs致卵巢对促排卵药物的反应性下降,降低优质胚胎率和可用胚胎数,使得种植率和临床妊娠率呈现下降趋势。第二部分SF-1和LRH-1在子宫内膜异位症卵巢颗粒细胞中的表达目的:通过测定P450芳香化酶编码基因CYP19、CYP19 PII、孤核受体家族成员类固醇生成因子-1(steroidogenic-1,SF-1)和肝受体类似物-1(liver receptor homolog-1,LRH-1)在EMs卵巢颗粒细胞中的表达及其相关性,探讨SF-1和LRH-1在EMs卵巢颗粒细胞P450芳香化酶表达下降机制中的可能作用。方法:选取16例腹腔镜诊断EMs的不孕女性(其中7例为I、II期EMs,9例为III、IV期EMs)和28例对照组女性纳入研究。收集IVF-ET治疗中的卵泡液分离纯化颗粒细胞,应用QT RT-PCR技术检测颗粒细胞中CYP19,CYP19 PII以及SF-1、LRH-1 m RNA水平并作比较和相关分析。结果:(1)EMs卵巢颗粒细胞中CYP19(P<0.05),CYP19 PII(P<0.001)以及SF-1(P<0.05)、LRH-1(P<0.001)m RNA的表达水平均较正常对照组降低;(2)Spearman相关分析结果显示仅EMs组颗粒细胞中SF-1和LRH-1 m RNA的表达水平与CYP19 PII m RNA呈正相关关系(P<0.05)。结论:EMs卵巢颗粒细胞中SF-1和LRH-1在转录水平的表达下降可部分解释EMs性不孕卵巢反应下降和卵子质量受损的机制,而SF-1、LRH-1和CYP19 PII在EMs颗粒细胞中的表达下降相关性是探讨EMs颗粒细胞P450芳香化酶活性下降机制的初步研究。第三部分子宫内膜异位症卵巢颗粒细胞SF-1基因启动子甲基化状态的研究目的:通过检测并比较EMs和正常女性卵巢颗粒细胞中SF-1基因启动子区5’Cp G位点甲基化水平探讨EMs卵巢颗粒细胞中SF-1表达下降的机制。方法:应用亚硫酸盐测序即BSP克隆测序法(Bisulfite Sequencing PCR,BSP)检测EMs和正常女性卵巢颗粒细胞SF-1基因启动子区5’Cp G位点甲基化水平,将测得的序列与原始序列比对,统计和比较甲基化位点、数量并分析两组甲基化程度。结果:亚硫酸盐测序片段涵盖SF-1基因转录起始位点附近的13个Cp G位点(从Cp G-84到Cp G+168),正常对照组颗粒细胞SF-1基因启动子区域的Cp G位点表现为差异甲基化状态,而EMs组SF-1基因启动子区域的整体甲基化水平显著高于对照组(P<0.05),逐个位点的分析显示EMs组Cp G+7,+18,+21,+42,+54,+60,+132以及+146位点相较于正常对照组呈现高甲基化水平(P<0.05);而EMs组Cp G+77,+121和+141位点的高甲基化水平尤为显著(P<0.001)。结论:EMs卵巢颗粒细胞SF-1基因启动子区5’Cp G位点甲基化水平显著高于对照组,尤其是+77,+121和+141Cp G位点,可能是EMs卵巢颗粒细胞SF-1 m RNA表达降低的机制。