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目的用体外实验研究CXC家族趋化因子I-TAC在小胶质细胞上的表达及其影响因素,同时观察I-TAC对原代T细胞的增殖、分化、黏附分子表达及趋化作用的影响,从而探讨I-TAC在神经系统退行性变中可能发挥的免疫调节作用。方法用LPS刺激小鼠小胶质细胞株N9,分别加入Aβ42、TNF-α、DEX以及特异性TLR4抗体,采用RT-PCR半定量分析检测I-TAC mRNA的表达,应用流式细胞术检测TLR2、TLR4在N9表面的表达。用尼龙毛分离纯化小鼠原代T细胞,加I-TAC培养,用ELISA检测培养上清中的IFN-γ和IL-4浓度。采用微孔隔离室迁移实验观察I-TAC对T细胞的趋化作用。原代T细胞及N9细胞在I-TAC刺激下的增殖实验采用MTT法。应用流式细胞术检测黏附分子CD11a在T细胞表面的表达。结果1、LPS与Aβ42均能诱导的N9细胞表达I-TAC mRNA;TNF-α能显著增加LPS诱导的I-TAC mRNA表达,DEX则降低其表达。2、N9细胞在LPS刺激前后均可表达TLR2及TLR4膜分子。在细胞培养中加入抗-TLR4抗体,I-TAC的表达量显著降低。3、重组I-TAC对小鼠T细胞产生Th1型细胞因子IFN-γ的增加占显著优势。在趋化实验中T细胞的迁移指数的增加呈I-TAC剂量依赖性,I-TAC浓度在200 ng/ml时迁移指数达4.964±1.398。在T细胞增殖实验中,与对照组相比,I-TAC使OD值显著增高;但在N9细胞增殖实验中I-TAC却使OD值显著下降。流式细胞技术检测显示I-TAC以剂量依赖的形式显著增加CD11a(LAF-1)阳性T细胞的百分比。结论1、LPS、TNF-α、Aβ42能够诱导N9细胞表达I-TAC mRNA,其中TNF-α对LPS的诱导作用具有协同效应,而DEX则具有拮抗效应。2、LPS促进N9细胞表面表达TLR2、TLR4。TLR4介导的信号传导可能是I-TAC表达的重要依赖因素。3、I-TAC能促进T细胞趋化、增殖、表达黏附分子及向Th1方向分化。