有机功能化SBA-15负载RML及其催化甘油解合成甘油二酯的研究

来源 :广东药科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:wjtezx
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甘油二酯(DAG)不仅拥有与传统油脂相似的口感与风味,而且还具有防止体内脂肪积聚、有效控制体重增加、降低血脂水平等特殊的生理作用。酶法制备DAG相比化学法有着温和的反应条件、高选择性和催化效率等优点。固定化酶是酶法制备DAG的首选,而通过后嫁接法引入有机官能团对介孔材料SBA进行改性能大大提升介孔材料SBA负载酶的的性能。本文研究了米黑根毛霉脂肪酶(RML)负载于有机官能团修饰的介孔材料SBA及其催化甘油解反应合成DAG,论文的主要研究内容和结果如下:(1)后嫁接法修饰的介孔材料SBA对RML进行固定化,采用X射线衍射(XRD)分析、X射线光电子能谱(XPS)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)对有机官能团修饰的SBA以及固定化酶进行表征,并与未修饰的SBA进行比较。结果表明,有机官能团成功修饰在SBA的表面,没有破坏SBA的孔道结构,RML也成功负载进有机官能团修饰的SBA的孔道内。(2)采用了十六种有机官能团修饰SBA,然后再负载RML,获得R-SBA-RML固定化酶(R为有机官能团),研究了所得固定化酶的酶学性质。结果发现N-十二烷基(C12H27N)-SBA-RML的酶活最高(13211.11±523.87 U/g),是SBA-RML酶活的66倍。C16H33-SBA-RML在正己烷体系和无溶剂体系下经70℃加热h后酶活均能保留100%;而缓冲溶液环境下C12H27N-SBA-RML,3-缩水甘油基(C6H11O2)-SBA-RML,3-氨丙基(C3H8N)-SBA-RML和甲基(CH3)-SBA-RML经相同加热条件后能保留57%以上的酶活。重复利用性方面C6H11O2-SBA-RML和3-巯丙基(C3H7S)-SBA-RML在五次使用后依然能维持100%活性。所研究的固定化酶中大部分在偏碱性条件(pH7.0和pH8.0)其酶活最高,而C3H8N-SBA-RML和3-(异丁烯酰氧)(C7H11O2)-SBA-RML在偏酸性条件下(pH4.0和pH5.0)酶活最高。(3)研究了三种离子液体修饰SBA负载RML酶的性质,辛基离子液体修饰的固定化酶达到了3422 U/g。酶活最低的CH3-IL-SBA-RML为(1422.22±401.85 U/g),但仍然显著优于未修饰的SBA-RML酶活(200±83.89 U/g)。C4H9-IL-SBA-RML在热稳定性方面保留有100%的酶活。重复利用性方面CH3-IL-SBA-RML在五次反应后依旧保留100%活性。(4)研究了所得固定化酶催化甘油解制备DAG。结果表明,有机官能团修饰SBA后再负载RML酶,其催化甘油解效果(DAG含量均高于45%)显著高于未经修饰的SBA直接负载RML的催化效果(DAG含量15.45%)。对其中部分固定化酶催化甘油解反应的反应进程进行了研究,结果表明,(C16H33)-SBA-RML和苯胺甲基(C7H9N)-SBA-RML在8h时的DAG含量最高,正十八烷基(C18H37)-SBA-RML、异氰酸丙基(C4H6ON)-SBA-RML、正辛基(C8H17)-SBA-RML和C7H9N-SBA-RML则在10h时的DAG含量最高。在C16H33-SBA-RML、C7H9N-SBA-RML和丁基(C4H9)-SBA-RML的重复利用性实验中发现在五次反应后DAG含量及甘油三酯(TAG)转化率均低于20%,重复利用性较差。(5)选择了部分官能团进行两种组合同时修饰SBA,然后再负载RML,研究了其酶学性质及催化甘油解制备DAG。结果表明,与单一官能团修饰SBA负载RML相比,两种官能团同时修饰(复合官能团)SBA负载RML的酶活有不同程度地下降,而热稳定性和重复利用性则更好,催化甘油解效果相当。
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