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S.aureus是生鲜牛奶潜在的食品安全隐患。采集泰安周边地区个体奶户中的未经处理的生鲜牛奶样品，分离鉴定样品中S.aureus，并结合分子分型、毒力基因筛查、醋酸氯己定MIC试验、抗生素药敏试验等试验技术，综合评估生鲜牛奶中S.aureus分子分型、毒力基因分布、醋酸氯己定耐受性和抗生素抗性，以期为乳制品风险评估及质量控制提供指导和借鉴。主要研究成果和结论如下: 1.生鲜牛奶中S.aureus的分离鉴定 通过形态学和分子生物学鉴定，从125份生鲜牛奶样品中分离鉴定出S.aureus共51株，检出率达40.8％。并根据mecA基因筛查结果，鉴定其中9株为MRSA。 2.生鲜牛奶中S.aureus对抗生素抗性研究 采用药敏纸片法测定51株S.aureus对抗生素抗性。其中对红霉素的耐药率达52.9％，对克林霉素、四环素和环丙沙星耐药率达33.3％、37.3％和31.4％，对利福平、庆大霉素、左氧氟沙星、阿米卡星、氨苄西林/舒巴坦耐药率为3.9-19.6％。未发现有对替考拉宁、利奈唑胺和万古霉素耐药的S.aureus。 3.生鲜牛奶中S.aureus的spa分型研究 51株S.aureus进行spa分型实验，共分为10个型，为t518、t519、t521、t2875、t377、t127、t189、t114、t437、t2460。MSSA中t518、t519和t521数量较多，分别有17株、10株和7株;MRSA中t114数量最多共有6株。本研究同时检出在人群中定植传播的spa型t114和t437。生鲜牛奶生产、加工及运输中存在的人为污染增加其安全隐患。 4.生鲜牛奶中MRSA的SCCmec分型和PFGE分型研究 对9株MRSA进行PFGE聚类和SCCmec盒区分。SCCmec分型结果显示，t114与t437为SCCmecⅢ型，t2460为SCCmecⅣ型。从生鲜牛奶中分离到的MRSA主要为SCCmecⅢ型。PFGE聚类共分5个PFGE簇（按80％相似度），包括一个簇（3株MRSA，3个PFGE型），另一个簇（3株MRSA，2个PFGE型）和3个单菌株PFGE型。生鲜牛奶分离MRSA的PFGE型多样。 5.生鲜牛奶中S.aureus的毒力基因分布研究 采用PCR技术对51株S.aureus进行毒力基因筛查。携带较多的是肠毒素基因sea(15.7％)、seb(25.5％)和seh(17.6％)。此外，sec、seg、sei、tsst及etb均有一定数量的阳性株检出。 6.生鲜牛奶中S.aureus的消毒剂外排泵基因分布和醋酸氯己定MIC研究 S.aureus中筛查到1株携带消毒剂外排泵基因qacA/B，其醋酸氯己定MIC为4mg/L。未发现其他消毒剂外排泵基因smr、qacG、qacJ、qacH。MSSA中醋酸氯己定MIC分别是8mg/L（4株）、4mg/L（30株）、2mg/L（5株）和1mg/L（3株），MRSA中醋酸氯己定MIC分别是8mg/L（2株）、4mg/L（5株）、2mg/L（1株）和0.5mg/L（1株）。生鲜牛奶中S.aureus的消毒剂外排泵基因检出率较低，醋酸氯己定MIC主要集中在4mg/L。