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目的:2型糖尿病是由体内胰岛素分泌不足或作用缺陷引起的糖脂代谢紊乱,胰岛β细胞功能缺陷以及胰岛素抵抗是2型糖尿病发病的关键环节。研究表明体内长期的高血糖状态使得胰岛β细胞和外周组织产生内质网应激、氧化应激、炎症反应从而导致胰岛β细胞功能缺陷及胰岛素抵抗。自噬与内质网应激、氧化应激、炎症反应密切相关,自噬可清除受损或死亡的细胞器和胞内生物大分子,减轻内质网应激、氧化应激、炎症反应对胰岛β细胞的损伤,维持β细胞的结构、数量和功能。现有证据证明二甲双胍通过自噬相关信号通路参与调控胰岛β细胞的自噬水平,为研究二甲双胍的降糖机制提供了新方向。然而,二甲双胍调控胰岛β细胞自噬的具体分子机制尚不明确。内质网应激与氧化应激通过激活c-JNK氨基酸激酶((c-Jun NH2-terminal Kinase,JNK)影响胰岛β细胞自噬相关蛋白Beclin-1的表达从而干扰了胰岛素的生物合成,因此JNK/Beclin-1在胰岛β细胞自噬及功能障碍中起到重要作用。JNK/Beclin-1信号通路调控胰岛β细胞自噬的具体机制尚未明确。本实验以小鼠MIN6胰岛β细胞作为模型,模拟体外高浓度葡萄糖环境,探讨二甲双胍通过JNK/Beclin1信号通路调节MIN6细胞自噬的分子机制及其作用。方法:分别用正常浓度(5.5mmol/L)葡萄糖和高浓度葡萄糖(33.3mmol/L)处理MIN6小鼠细胞株,蛋白印迹分析检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3的表达情况。分别或同时使用2mmol/L二甲双胍、自噬特异性抑制剂3-MA、特异性JNK信号抑制剂SP600125处理,透射电镜检测细胞中自噬体亚显微结构;免疫荧光法观察胞质中LC3荧光的变化;蛋白印迹分析检测细胞内通路相关蛋白JNK总蛋白及磷酸化p-JNK蛋白水平和自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达。结果:1、高糖抑制MIN6细胞自噬水平。与正常糖对照组相比,透射电镜及Western Blot检测显示高糖培养条件下的小鼠min6胰岛细胞自噬水平受到抑制。2、二甲双胍激活MIN6细胞的自噬水平。二甲双胍处理组MIN6细胞自噬相关蛋白表达水平较对照组明显升高,LC3免疫荧光提示二甲双胍处理组的LC3荧光表达水平较对照组增加。3、二甲双胍处理组中p-JNK、Beclin-1及LC3蛋白表达水平增加;JNK特异性抑制剂SP600125抑制自噬相关蛋白Beclin-1、LC3的表达活性。结论:二甲双胍通过JNK/Beclin-1信号通路诱导了MIN6细胞自噬,改善高糖环境对MIN6细胞自噬水平的抑制,减缓糖尿病的发生发展。